KDR基因重组噬菌体疫苗的构建及其抗肿瘤效应的初步研究

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背景和目的:肿瘤的生长和转移依赖新生血管的生成,VEGF及其受体VEGFR系统在肿瘤新生血管生成过程中起了主导作用,利用主动免疫打破对自身抗原(与血管形成相关)的免疫耐受是目前肿瘤治疗的一个热点,血管内皮细胞基因稳定,不存在MHC Ⅰ和MHC Ⅱ抗原的下调,以血管内皮生长因子受体为靶点有别于传统的肿瘤疫苗,KDR是介导VEGF在肿瘤新生血管形成中发挥功能的主要受体,KDR与VEGF的亲和力虽然较弱,而其酪氨酸激酶活性很强,在VEGF介导的血管形成特性中,如促有丝分裂作用,化学趋化作用,诱导形态改变起主要作用,其特点决定了KDR是肿瘤抗血管治疗的一个重要靶点。噬菌体展示技术具有特异的基因-蛋白藕联机制,以其来制备重组疫苗,属于病毒载体疫苗,兼具DNA疫苗和蛋白疫苗的优势,既可以在基因水平把握某一蛋白的立体构型,又可以对其DNA序列进行各式各样的修饰,并在其展示过程中进行蛋白水平检测,有利于方便、快捷、有效地将基因的序列分析与蛋白的功能研究相结合。T7噬菌体是一种感染大肠杆菌的烈性噬菌体,其衣壳蛋白主要有两种形式:P10A(344aa)和P10B(397aa),其成熟的衣壳可全部由P10A或P10B组成也可由不同比例的P10A和P10B组成,P10B是在P10A的phe341处翻译移码产生的,P10B比P10A多出的肽段在其衣壳蛋白构建中是非必需的,因而可对p10进行改造,将自然状态下的翻译移码位点去除,并在348位氨基酸之
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