本研究以鳞翅目模式昆虫家蚕中的敏感品种734和耐氟品种T6为材料,应用差异显示技术对家蚕耐氟性相关基因进行筛选,并分析这些差异基因的功能。氟化物通过污染桑叶造成家蚕大量死亡,严重危害蚕桑业的发展,同时人类及其他生物也深受其害。阐明家蚕耐氟中毒的机理,为设计相关药物防御及治疗氟中毒提供新的方向。其主要结论如下:1.统计分析家蚕734品种和T6品种5龄期浸叶法添食200mg/kg氟化钠后的生理生化改变。在200mg/kg的氟化钠浓度下,T6品种能正常生长,734品种表现明显氟中毒症状,T6耐氟品种死亡率比敏感品种734低,体重增长率与敏感品种734差异显著。提示T6品种可能存在耐氟基因。2.通过mRNA差异显示技术,在家蚕耐氟品种T6和敏感品种734脂肪体中筛选参与解氟代谢相关的基因,获得了一个位于线粒体膜上与转运磷酸根离子至线粒体内与ADP合成ATP相关的磷酸根转运蛋白Bmptp基因,半定量结果显示Bmptp基因在T6耐氟品种所受氟化物的影响明显比734品种低,说明氟化物可能通过影响Bmptp基因表达从而影响ATP合成,导致家蚕供能不足,引起中毒症状。3.利用氟离子选择电极法测量家蚕耐氟品种T6和敏感品种734脂肪体的氟浓度,结果显示T6能通过氟代谢使体内氟浓度维持在安全阀值内,而734则累积氟,提示脂肪体可能参与了氟代谢。4.差异显示实验过程中获得了另一个在家蚕耐氟品种T6高表达而在敏感品种734低表达的基因Bmcyp333a2。RT-PCR结果表明,其在T6品种脂肪体中表达量相对较高,在各组织都有表达而家蚕添氟后氟离子逐渐遍布累积于各组织,推测其可能与家蚕耐氟有关。