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乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)是参与人体内乙醛代谢的关键性酶之一,能够催化多种脂肪族和芳香族的醛类氧化为相应的酸,从而降低醛类物质在体内的毒性。目前,ALDH主要是用色谱柱技术从动植物细胞中分离提取,费用高、纯化产率低、ALDH含量少,难大规模生产。随着该酶的需求增大,如何找到ALDH含量高的替代物以及简便快速地获得大量纯化的乙醛脱氢酶成为研究的重点,微生物具有易于培养、培养周期快等优点,从其细胞里提取ALDH具有很大前景。本文研究了以雪峰高低糖型干酵母、废弃啤酒酵母、安琪酵母片、彩虹干酵母、燕牌干酵母做为提取ALDH的菌种,结果表明雪峰低糖型干酵母中ALDH含量最高;选用了超声破碎法、反复冻融法、化学渗透法、研磨法来提取雪峰干酵母中ALDH,结果表明超声破碎法得到的粗酶液ALDH活力最高;探究了超声破碎细胞中各影响因素,得到超声破碎提取雪峰干酵母中ALDH的最佳工艺:料液比1:4、处理量20ml、提取缓冲液的pH值8.0、超声功率300W、超声全程时间16min,在此最佳工艺下获得的粗酶液中ALDH活力高达3.56U/mL。研究了用盐析沉淀法、柱层析法和双水相萃取法来分离纯化超声破碎得到的ALDH粗酶液。结果表明经两次硫酸铵分级沉淀后,ALDH回收率可达71.77%和纯化倍数达到2.200;经两次硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-75分离后,回收率达31.31%和纯化倍数达到2.705;经PEG2000/Na2SO4双水相萃取后,回收率可达70.00%和纯化倍数达到2.069。通过电泳图谱,纯化前后的ALDH酶液与标准品有一条共同的蛋白带,因此雪峰干酵母中ALDH单体分子量约为57kDa。研究了雪峰低糖型干酵母中ALDH的部分酶学性质,结果表明其最适反应pH为8.0,适合保存在pH6.5的磷酸缓冲液里;其最适反应温度为25℃,25℃下保温时ALDH活力较高。各种金属离子对雪峰低糖型酵母中ALDH活力影响各不相同,通过以加钾离子的ALDH活力为对照实验,铝离子和铁离子对ALDH活力的抑制作用较强;锌离子和铜离子的抑制作用最强;钙离子对ALDH活力有一定的抑制作用,镁离子对ALDH活力基本没有抑制作用;钠离子加强盐析作用,抑制ALDH的酶活。该ALDH具有广泛的底物专一性,丙醛是雪峰低糖型干酵母中ALDH最好的反应底物,其次是乙醛,对甲醛的反应活性很小。