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1、研究背景：银屑病病是皮肤科的常见病和多发病,且是中医治疗的优势病种之一。近几年随着空气污染及社会压力的增大,有发病率均有逐年提高的趋势。“清热活血解毒复方”作为一种临床有效疗法,30多年来一直是我科临床治疗“血热证”寻常型银屑病所用,它可以有效促进性皮损的消退,延长缓解期,减少复发。由于中药成分复杂,清热活血解毒复方治疗银屑病的作用机制,前面我们虽然做了大量研究,但其作用机制至今仍不清楚。2、研究目的：以人永生化角质形成细胞HaCat细胞为研究对象,观察清热活血解毒复方和丹皮酚对人永生化角质形成细胞HaCat细胞的增殖、凋亡、及相关凋亡基因的影响,对炎症因子的分泌及相关促炎基因的影响,以揭示探讨清热活血解毒复方治疗银屑病的机理,为临床和科研提供思路和指导。3、研究方法：3.1采用CCK-8、流式细胞仪技术、RT-PCR及Western Blot技术方法观察清热活血解毒复方对Hacat细胞增殖、凋亡及凋亡基因Bcl-x1、Bax表达的影响。采用酶联免疫吸附试验(ELISA) 、RT-PCR及Western Blot技术方法观察清热活血解毒复方对Hacat上清中细胞因子IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8分泌及p38表达的影响。3.2采用CCK-8、流式细胞仪技术、RT-PCR及Western Blot技术方法观察清热活血解毒复方对TNF-α诱导的Hacat细胞增殖、凋亡及凋亡基因Bcl-x1、Bax表达的影响。采用联免疫吸附试验(ELISA)、RT-PCR及Western Blot技术方法观察清热活血解毒复方对TNF-α诱导的Hacat上清中细胞因子IFN-γ、 IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8分泌及p38表达的影响。3.3采用CCK-8、流式细胞仪技术、RT-PCR及Western Blot技术方法观察丹皮酚对Hacat细胞增殖、凋亡及凋亡基因Bcl-x1、Bax表达的影响。采用联免疫吸附试验(ELISA)、RT-PCR及Western Blot技术方法观察丹皮酚对Hacat上清中细胞因子IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8分泌及p38表达的影响。3.4采用CCK-8、流式细胞仪技术、RT-PCR及Western Blot技术方法观察丹皮酚对TNF-α诱导的Hacat细胞增殖、凋亡及凋亡基因Bcl-x1、Bax表达的影响。采用联免疫吸附试验(ELISA)、RT-PCR及Western Blot技术方法观察丹皮酚对TNF-α诱导的Hacat上清中细胞因子IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8分泌及p38表达的影响。4.研究结果：4.1结果显示清热活血解毒复方可以抑制HaCat细胞的增殖,促进HaCat细胞的凋亡,并可以上调Bax mRNA及蛋白的表达。4.2结果显示清热活血解毒复方可以抑制TNF-α诱导的HaCat细胞的增殖,促进HaCat细胞的凋亡,并可以上调Bax mRNA及蛋白的表达。同时,清热活血解毒复方还可以降低TNF-α诱导的HaCaT细胞培养上清中IFN-γ、IL-1β、IL-2、 IL-6、IL-8的浓度,其中可以显著降低IFN-γ、 IL-1β的浓度。4.3结果显示丹皮酚可以抑制HaCat细胞的增殖,促进HaCat细胞的凋亡。同时,丹皮酚可以降低HaCaT细胞上清中IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-8的浓度。4.4结果显示丹皮酚可以抑制TNF-α诱导的HaCat细胞的增殖,促进HaCat细胞的凋亡。同时,丹皮酚还可以降低TNF-α诱导的HaCaT细胞上清中IFN-γ、 IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8的浓度。5、结论：由上研究结果可知,清热活血解毒复方一方面可以上调促凋亡基因Bax的表达,进而诱导角质形成细胞的凋亡,以抑制角质形成细胞的异常增殖；另一方面,可以下调IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8的浓度,从而改善机体的免疫功能,以调整角质形成细胞的的异常增殖与分化、减少炎症细胞的浸润。这两方面可能是其治疗银屑病的机制。丹皮酚一方面可以诱导角质形成细胞的凋亡,进而抑制角质形成细胞的异常增殖；另一方面,也可以下调IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8的浓度,从而改善机体的免疫功能,以调整角质形成细胞的的异常增殖与分化、减少炎症细胞的浸润。这两方面可能是其治疗银屑病的机制。但是由于中药复方成分复杂,加之实验条件有限,所以清热活血解毒复方治疗银屑病的确切机制,仍需要我们做大量的研究工作。