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油藏是典型的油/气/水共存为一体的高压、高矿化度环境，其中孕育着丰富的微生物资源及基因资源。油藏环境微生物的解析和认知是开发和利用油藏微生物资源的基础，对能源生物技术的研究与发展有重要意义。但是，由于油藏环境的特殊性，目前对油藏微生物群落结构与功能的认识仍然有限。 本文采用构建细菌和古菌16SrRNA基因克隆文库的方法，对比研究了低温油藏（油藏温度21℃）注水井和4口采油井产出液中的微生物群落结构。结果显示，注入水、T6073、T6190、T6189、T6180这5个样品优势细菌分别属于Spirochaetes、ε-Proteobacteria、Bacteroidietes、Spirochaetes、ε-Proteobacteria;优势古菌分别为Methanomethyovorans、Methanoculleus、unclassifiedArchaea、unclassifiedArchaea、unclassifiedArchaea。5个样品绝大部分克隆序列与已报道的低温油藏中检测到的克隆具有很高的相似度。虽然这四口采油井都注相同来源的水开采，但呈现不同的微生物组成。 采集高温油藏产出液，不添加任何外源物质，密封置于55℃培养，在420d时检测到顶空有1634μmolCH4和107μmolH2。通过构建16SrRNA基因克隆文库发现，培养后优势细菌由Pseudomonadales变为Hydrogenophilales，在420d培养物中还检测到Anareolineales、β-、γ-、δ-Proteobacteria。优势古菌由乙酸营养型产甲烷菌Methanosaeta变为氢营养型产甲烷菌Methanothermobacter。该培养体系中产甲烷的主要途径为由氢营养型产甲烷菌利用H2和CO2产生甲烷。 以葡萄糖为碳源，60℃富集培养高温油藏产出液158d，优势细菌为OP9，古菌主要有Methanosarcinales和Methanobacteriales;以葡萄糖为碳源，产甲烷条件和硫酸盐条件下室温下富集培养低温油藏产出液158d，产甲烷条件下优势菌分别隶属于ε-Proteobacteria和Methanobacteriales，而硫酸盐还原条件下优势菌隶属于δ-Proteobacteria和Methanomicrobiales。培养前后微生物群落对比分析表明，葡萄糖对油藏内源微生物的激活具有选择性，电子受体SO42-特异性地激活了一些可以利用SO42-的细菌，该硫酸盐还原培养体系中硫酸盐还原菌与产甲烷菌竞争存在;与产甲烷培养条件比较，硫酸盐还原条件培养菌群呈现较丰富的多样性。 本研究丰富了对油藏微生物多样性及其变化的认识，为油藏微生物资源的开发利用提供了有益的参考。