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背景动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)引起的心脑血管疾病是引起人类死亡的头号杀手。泡沫细胞的形成是AS早期的标志之一,也是AS发生、发展的关键步骤。泡沫细胞形成的主要原因是巨噬细胞内胆固醇流入和流出的失衡。因此,促进泡沫细胞内胆固醇流出能够抑制泡沫细胞的形成,延缓动脉粥样硬化病变的发生与发展。胆固醇逆转运(RCT)是指HDL将多余的胆固醇从周围组织(包括动脉粥样斑块)、细胞转运到肝脏进行机体的再循环或以胆酸的形式排出体外,这一过程包括组织细胞胆固醇的流出至细胞外受体(如HDL)、胆固醇的酯化以及清除。近来,如何促进巨噬细胞RCT成为抗动脉粥样硬化研究的热点。β3-AR最早被发现于1980年,主要在白色和棕色脂肪组织表达,近年研究发现其在心脏、脑、肺脏及肝脏等组织也有表达。本课题组近年的研究发现,激动Apo E-/-小鼠β3-AR能够改善血脂代谢紊乱,降低TC、VLDL/LDL-C和TG,升高HDL;促进胆固醇经胆汁及粪便排出;缩小胸主动脉动脉粥样硬化斑块面积,由此推断β3-AR可能通过促进胆固醇逆转运起到抗动脉粥样硬化作用。本研究使用β3-AR激动剂与拮抗剂刺激Hep G2细胞,观察其上清液对RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞内脂质及胆固醇流出的影响,探索β3-AR对RCT的影响及其可能机制,为临床开发新型抗动脉硬化药物提供理论依据。目的通过激动或抑制Hep G2细胞的β3-AR,观察其分泌蛋白对巨噬细胞源性泡沫细胞荷脂过程的影响,探索β3-AR调节胆固醇逆转运(RCT)过程的可能机制。方法使用β3-AR激动剂(BRL37344)和β3-AR拮抗剂(SR52390A)分别刺激培养的Hep G2细胞,Elisa法检测上清液Apo A-I、Apo A-II、Apo B及β3-AR含量;实时定量PCR和蛋白印迹法分别检测细胞内Apo A-I、Apo A-II、Apo B、β3-AR、PPARγ及PPARα含量;以ac-LDL(50μg/m L)诱导巨噬细胞源性泡沫细胞形成,收集Hep G2各组细胞上清液,加入巨噬细胞源性泡沫细胞共同孵育,采用油红O染色进行细胞形态学观察,酶法测定细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)水平,3H标记的胆固醇测定胆固醇流出率,蛋白印迹法检测细胞中ABCA1和ABCG1的表达。结果1、对Hep G2细胞进行Elisa检测结果表明,与空白对照组相比,BRL37344组Apo A-I水平显著升高(P<0.01),SR59230A组Apo A-I水平显著降低(P<0.01);与空白对照组相比,BRL37344组Apo A-II含量显著降低(P<0.01),SR59230A组Apo A-II水平无显著性差异(P>0.05);Apo B水平在三组上清液中无显著性差异(P>0.05)。2、RT-PCR结果表明,与空白对照组相比,BRL37344组Apo A-I m RNA水平显著升高(P<0.01),SR59230A组Apo A-I m RNA水平显著降低(P<0.01);与空白对照组相比,BRL37344组Apo A-II m RNA水平显著降低(P<0.01),SR59230A组Apo A-II m RNA水平无显著性差异(P>0.05);与空白对照组相比,BRL37344组β3-AR m RNA水平显著升高(P<0.01),SR59230A组β3-AR m RNA水平显著降低(P<0.01);Apo B水平在三组中无显著性差异(P>0.05)。Apo A-I,Apo A-II和Apo B蛋白表达水平与m RNA表达情况相同。3、BRL37344刺激显著上调Hep G2细胞中PPARγ的表达(P<0.01),但不增加Hep G2细胞中PPARα的表达(P>0.05),SR59230A刺激使Hep G2细胞中PPARγ的表达水平显著下调(P<0.01),对PPARα的表达无影响(P>0.05)。BRL37344刺激引起的Apo AI蛋白表达上调效应可被PPARγ拮抗剂GW9662所阻断(P<0.01)。4、酶法检测结果表明,与空白对照组相比,BRL37344组细胞内TC、CE水平显著降低(P均<0.05),SR59230A组细胞内TC、CE水平显著升高(P均<0.05);与空白对照组相比,BRL37344组细胞内FC水平显著升高(P<0.01),SR59230A组细胞内FC水平无显著差异(P>0.05)。5、与空白对照组相比,BRL37344刺激的Hep G2细胞上清液显著上调巨噬细胞内ABCA1蛋白的表达(P<0.01);SR59230A组ABCA1蛋白的表达无显著性差异(P>0.05);巨噬细胞内ABCG1蛋白表达在三组之间无显著性差异(P>0.05)。结论1.激动β3-AR明显上调Hep G2细胞内Apo A-I蛋白水平表达;2.激动β3-AR显著上调Hep G2细胞内PPARγ蛋白的表达;3.激动β3-AR对Hep G2细胞内Apo A-I蛋白表达的上调可能依赖PPARγ途径;4.β3-AR激动后的Hep G2细胞上清液能够促进巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇流出。5.β3-AR激动后的Hep G2细胞上清液可能通过ABCA1途径促进泡沫细胞内胆固醇流出。背景二级预防药物的使用能够为血运重建患者带来临床获益,比较经皮冠状动脉介入和冠状动脉搭桥患者术后二级预防药物的使用、血脂、血压及血糖达标率及终点事件发生率情况的研究鲜见报道。目的通过对PCI和CABG术后患者二级预防药物使用、血脂、血压及血糖达标率及终点事件发生率的分析比较,探讨PCI和CABG术后患者心血管相关危险因素控制情况是否存在差异及对预后的影响。方法回顾性分析2014年1月1日至2014年12月31日在我院行PCI和CABG患者共14230例,从临床电子病历数据库中提取资料,排除基线资料、用药情况缺失患者7707例,最终有6523例(PCI=4728,CABG=1795)患者纳入统计学分析。结果1.在未进行匹配的患者中,与CABG组相比,PCI组LDL-C<1.8 mmol/L,LDL-C<2.07 mmol/L及BP<140/90mm Hg达标率更高(P均<0.01),FBG和Hb A1C达标率在两组之间无显著性差异(P>0.05)。倾向性评分匹配患者中LDL-C<1.8 mmol/L、LDL-C<2.07 mmol/L、BP<140/90mm Hg、FBG及Hb A1C达标率与未匹配患者结果一致。2.在未匹配的PCI患者中,与年龄≥60岁的患者相比,年龄<60岁的患者BP<140/90mm Hg达标率显著升高(P<0.01),但LDL-C<2.07mmol/L达标率显著降低(P<0.01);在未匹配CABG患者中,与年龄≥60岁的患者相比,年龄<60岁的患者FBG<7 mmol/L,Hb A1c<7%及BP<140/90mm Hg达标率显著升高(P均<0.01)(P>0.05)。3.在未匹配的PCI患者中,与女性患者相比,男性患者LDL-C<1.8 mmol/L,FBG<7 mmol/L及Hb A1c<7%达标率显著升高(P均<0.01);在未匹配的CABG患者中,女性和男性性LDL-C<1.8 mmol/L,LDL-C<2.07 mmol/L,BP<140/90mm Hg,FBG<7 mmol/L及Hb A1c<7%达标率均无显著性差异(P均>0.05)。4.在倾向性评分匹配后患者中,与CABG组相比,PCI组患者出院时使用他汀、ACEI/ARB、β受体阻滞剂的比例更高(P均<0.01),合用依折麦布、贝特类降脂药物的患者比例更高(P均<0.01),两组患者中阿司匹林使用率无显著性差异(P>0.05)。5.在未匹配患者,PCI组复合终点事件发生率显著高于CABG组(P<0.01);在倾向性评分匹配患者,PCI和CABG患者复合终点事件发生率无显著性差异(P>0.05)。多变量COX回归分析发现LDL-C<1.8 mmol/L和HBA1C<7%是影响PCI和CABG患者复合终点事件发生的独立预测因子,患者LDL-C<1.8mmol/L和HBA1C<7%达标与复合终点事件发生风险降低显著相关。结论1.在总体和倾向性评分匹配的患者,PCI和CABG患者的血脂、血压达标率均存在差异,两组患者血脂、血糖及血压达标率都不高;2.在PCI和CABG术后患者中,年龄<60岁和年龄≥60岁患者血脂、血压及血糖达标率存在差异,女性和男性患者血脂、血糖达标率存在差异;3.LDL-C<1.8 mmol/L和HBA1C<7%达标与复合终点事件发生风险降低显著相关。