新疆野苹果(Malus sieversii)属于第三纪孑遗物种,是苹果基因资源宝库,被列为中国濒危二级重点保护植物,然而其正受到病害的严重威胁。木霉是世界公认的高效安全的生防因子,因此使用木霉防治新疆野苹果的病害前景远大。本研究从新疆巩留县新疆野果林下植被根系土壤采集土样47份,开展木霉的分类与鉴定工作,筛选并研究了两株生防优势菌株,进行了新疆野苹果苗病害的防治试验,主要结果如下:鉴定出哈茨木霉(T.harzianum)、俄罗斯木霉(T.rossicum)、棘孢木霉(T.asperellum)、长枝木霉(T.longibrachiatum)、钩状木霉(T.hamatum)、深绿木霉(T.atroviride)、洋大戟草木霉(T.piluliferum)和渐绿木霉(T.viridescens)共8种木霉。共分离出俄罗斯木霉364株,渐绿木霉276株,棘孢木霉85株,哈茨木霉63株,深绿木霉40株,洋大戟草木霉9株,钩状木霉6株,长枝木霉1株。共844株木霉菌。收入试验室菌种保藏库,编号为NECC20362-NECC21205.描述了 8种木霉在PDA、CMA、SNA和MA培养基上的菌落形态和显微结构(分生孢子和分生孢子梗)。利用扫描电子显微镜观察8种木霉的特征。在30000倍扫描电镜下观察了不同木霉孢子,木霉孢子表面的疣突纹饰作为形态鉴定的依据,同时还可能影响木霉的生活史,如孢子的识别和萌发。筛选出了新疆巩留县优势生防木霉为俄罗斯木霉和哈茨木霉。使用哈茨木霉T2和俄罗斯木霉T7与尖孢镰刀菌和链格孢菌分别对峙发现两种木霉均能有效抑制两种病原菌生长,抑菌率计算发现哈茨木霉T2对尖孢镰刀菌的抑菌率为75.47%,对链格孢菌的抑菌率为78.17%。俄罗斯木霉T7对尖孢镰刀菌的抑菌率为79.66%,对链格孢菌的抑菌率为91.53%。使用不同方式处理新疆野苹果幼苗后,通过观察植物活体叶片发现木霉能有效减弱病原菌对植株的伤害,而仅使用木霉处理的新疆野苹果幼苗长势更好。新疆野苹果叶片NBT染色发现,病原菌使植株叶片活性氧含量上升,而使用木霉和病原菌共同处理植株使植株叶片活性氧含量相对降低,起到保护作用。通过观察植株根部发现,哈茨木霉T2和俄罗斯木霉T7均有助于促进新疆野苹果幼苗主根和侧根生长。尖孢镰刀菌对新疆野苹果幼苗根部损害严重,而链格孢菌对根部影响不大。使用两种木霉均能有效减轻尖孢镰刀菌和链格孢菌对新疆野苹果幼苗根部的影响。在扫描电子显微镜下观察处理5 d的哈茨木霉T2和俄罗斯木霉T7均在新疆野苹果幼苗根部表面长出致密的菌丝,同时观察到哈茨木霉孢子萌发,表明木霉的防治是可持续的。另外还观察到哈茨木霉孢子表面疣突纹饰形态发生变化及与菌丝融合。使用荧光定量PCR技术分析了使用木霉和链格孢菌处理新疆野苹果幼苗后PR1-1,PR1-2,PDF-1和PDF-3基因的表达量。结果表明,这四个基因都能响应病原菌侵染,在病原菌与木霉同时存在的情况下,它们的表达量相对于病原菌单独存在时更高,在处理72h后达到峰值,分别为35.59倍,29.79倍,18.55倍和12.35倍,表明木霉能加强新疆野苹果对病原菌的响应。但木霉处理对PR1-1和PR1-2的表达量影响并不明显,在72 h时分别为2.36倍和1.55倍,但却显著提高了PDF-和PDF-3的表达量,在72 h时分别达到6.56倍和14.85倍,表明木霉可能不会诱导水杨酸信号途径相关基因的表达,而主要是通过茉莉酸途径提高了新疆野苹果的抗病性。筛选出了巩留县本地的生防优势木霉菌株,并为新疆野果林的生物防治提供指导建议。