人血清白蛋白—人粒细胞集落刺激因子(Ⅰ)融合蛋白的表达与纯化及GMP生产

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人粒细胞集落刺激因子(hG-CSF)在肿瘤放疗、化疗引起的粒细胞减少症、再生障碍性贫血、放射病等血液病的治疗及骨髓移植方面具有重要作用,现已应用于临床,是每年销售额最大的几个生物制品药物之一。hG-CSF的最大缺陷是在血浆中半衰期较短。为了延长hG-CSF半衰期,本文成功利用甲醇酵母表达系统开发了人血清白蛋白和粒细胞集落刺激因子融合蛋白(rHSA-G-CSF)作为长效的基因工程药物。首先用PCR方法将HSA和hG-CSF两个片段连接,再克隆到酵母分泌型表达载体pPIC9中,经酶切线性化后原生
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现有的致癌性短期预测遗传毒性试验,大多只限于检测遗传毒性致癌物(genotoxic carcinogen),而不能检测非遗传毒性致癌物(non-genotoxiccarcinogen)。建立快速、简便、可靠的体外方法检测非遗传毒性致癌物在药物早期研发阶段具有重要意义,是当前安全性评价毒理学研究中亟需解决的问题。细胞转化试验通常采用细胞灶法判定结果,但该方法费时且主观性较强。本研究在细胞灶法的基础上
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目的:1、研究宫内感染致胎鼠脑组织肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-α)及S-100蛋白(S-100)表达的影响,探讨TNF-α、S-100在宫内感染致胎鼠脑白质病变中的作用。2、研究地塞米松(Dexamethasone,Dex)对宫内感染致胎鼠脑组织TNF-α、S-100蛋白水平的影响,探讨Dex对宫内感染致胎鼠脑白质病变的保护作用。方法:1、实验分组:40只清洁级健康成年SD大鼠(雄性10只,雌性30
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目的:观察不同氨氯地平对SHR大鼠血压、肾脏的影响。方法:30只16周龄雄性SHR大鼠随机分为SHR对照组、氨氯地平干预组、左旋氨氯地平干预组。运用鼠尾动脉测压仪每2周测尾动脉压1次,实验末经颈总动脉测压,腹主动脉取血,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清ET-1、hsCRP、IL-6、TNF-α水平;留取肾脏组织计算双肾肥大指数,然后固定,石蜡包埋,切片行苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏形态结构
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目的:观察氯化镧(lanthanum chloride)对RANKL(Receptor activator of NF-κBligand)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7向破骨细胞分化的作用。观察破骨细胞基因(c-fos、trap、cathepsin K、MMP-9)及NF-κB通路基因(traf6、c-src、RANK、Fra1)mRNA的表达,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞生
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目的:(1)建立动物抑郁模型(小鼠绝望实验模型和小鼠获得性无助实验模型)考察腹腔注射"N2011”对小鼠的抗抑郁作用。(2)建立液相色谱-串联质谱(LC-MS)法测定大鼠血浆中"N2011”的浓度。(3)研究大鼠腹腔注射"N2011”后,体内“N2011”的药代动力学特征,建立"N2011”在大鼠体内的药-时曲线,为重复给药提供依据。方法:(1)建立小鼠绝望实验模型和小鼠获得性无助实验模型,试验分
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目的γ-氨基丁酸(GABA)在人体中含量的变化会引起与其相关的一些疾病,为了鉴定、预防和治疗这些疾病,γ-氨基丁酸的含量测定在动植物方面都具有极其重要的意义。发芽糙米是目前研究γ-氨基丁酸最多的一种物质。基于纳米材料的特有性质,本研究首次利用ZnO纳米粒子对电极进行修饰后,测定发芽糙米中γ-氨基丁酸的含量,并与未修饰的电极进行比较。此方法对糙米中γ-氨基丁酸的含量可用于检测鉴定,以确定其中的营养价
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鉴于苯并呋喃类衍生物和噻唑酰胺类化合物较好的杀虫和杀菌活性,本文将噻唑和酰胺引入到苯并呋喃环中以期获得活性较好的先导化合物。本文的研究内容主要有:2-溴-1-(7-烷氧基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)乙/丙酮的合成:以呋喃酚为原料,经醚化反应、傅克酰基化反应得到1-(7-烷氧基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)乙/丙酮(2),并探讨了不同催化剂对酰化反应收率的影响。
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碱硅酸反应(ASR)可以导致混凝土结构中产生裂缝,裂缝扩展会最终造成混凝土的崩溃。当碱硅酸反应正在发生但尚未对混凝土结构造成严重破坏时,采取补救措施,有利于提高现有混凝土的耐久性能,具有重要的理论意义和工程价值。实验参照ASTM C1260,利用快速砂浆棒法来分析Al~(3+)对碱硅酸反应的抑制效果,研究了Al~(3+)浓度和渗入时机对抑制效果的影响。结果显示,Al~(3+)对ASR引起的膨胀有明
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