目的：　　 1．了解温州医学院附属第一医院2005年～2010年间临床分离肠杆菌属细菌的分布情况及耐药特性，为临床抗菌药物选择提供依据。　　 2．研究2005年～2010年不依赖耐药背景的产气肠杆菌临床连续分离株中质粒介导喹诺酮类耐药基因的分布和特性。　　 3．研究质粒介导的喹诺酮类耐药基因与ESBL携带率的相关性，并分析其与不同抗菌药物耐药性的关系。　　 方法：　　 1．回顾性调查2005年～2010年间临床分离肠杆菌属细菌的临床感染分布特点，分析肠杆菌属细菌的耐药性及变迁情况。　　 2．PCR筛选产气肠杆菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因(qnr，aac(6)-Ib-cr，qepA)及ESBLs基因，阳性产物进行DNA测序以确定基因型。　　 3．选取14株PMQR基因阳性菌株进行接合转移试验，以探讨质粒介导的喹诺酮类耐药基因的转移性，PCR验证接合子的耐药基因，E-test法测受体菌、接合子MIC;琼脂稀释法检测供体菌MIC，分析耐药基因与耐药性的关系。　　 结果：　　 1．本研究6年间共收集肠杆菌属细菌273株，其中以阴沟肠杆菌最多，含173株(63.4％)，其次为产气肠杆菌93株(34.1％)，聚团肠杆菌3株(1.1％)，河生肠杆菌3株(1.1％)，中间肠杆菌1株(0.3％)。按标本来源分，以痰液标本最多，占46.5％(127/273)，其次为尿液、脓液、血液和引流液等。临床常用抗菌药物中，敏感性最好的为亚胺培南，273株中仅有4株耐药，敏感率达98.5％；其次为左氧氟沙星(敏感率74.8％)和环丙沙星(敏感率74.0％)，耐药率最高的是氨苄西林，耐药率达99.2％；其次是头孢曲松。ESBLs的总检出率高达55.3％，各年度检出率都维持在50％左右的高水平。　　 2.93株产气肠杆菌中共检出31株携带PMQR基因，其中有11株同时携带两种以上PMQR基因。qnr基因阳性菌株27株，qnrA共4株，qnrB共8株，qnrS共19株，经BLAST比对分析，基因型包括qnrS1、qnrB2、qnrB4、qnrB6和qnrA1;测得的序列与GenBank中已登录的qnr基因家族序列100％同源，未见突变株。未检出qnrC、qnrD基因。　　 3.93株产气肠杆菌中，aac(6’)-Ib基因阳性菌株为14株，阳性率为15.1％，对阳性菌株进行DNA测序、BLAST比对，其中6株为aac(6’)-Ib-cr，2株为aac(6’)-Ib的变异株，变异株为第119位氨基酸与第173位氨基酸的突变。其余6株均为aac(6’)-Ib野生型。　　 4．本研究93株产气肠杆菌中未检出qepA基因。　　 5.31株PMQR基因阳性菌株中有17株同时携带ESBLs基因，而62株PMQR基因阴性菌株中仅10株携带ESBLs基因，两者存在显著性差异(P＜0.01)。PMQR基因阳性和阴性株细菌对喹诺酮类和氨基糖苷类的耐药率无统计学差异，对三代头孢菌素耐药率和ESBLs阳性率存在显著性差异(P＜0.01)。　　 6.14株PMQR基因阳性菌株中，接合转移试验成功7株，接合子对多种抗菌药物的MIC有不同程度的提升。特异性PCR证实接合子和供体菌具有相同的耐药基因。　　 结论：　　 1．临床分离肠杆菌属细菌耐药严重，对多种临床常用抗菌药物的不敏感率在40％以上，对亚胺培南敏感性最高，环丙沙星，左氧氟沙星的敏感性也较高，可作为临床肠杆菌属细菌感染的首选。　　 2．我院产气肠杆菌PMQR基因以qnr基因为主，其次为aac(6’)-Ib-cr基因，qnr基因中以qnrS为主，基因亚型包括qnrS1、qnrB2、qnrB4、qnrB6、qnrA1，未检出qepA基因。　　 3．本研究以不考虑耐药背景的产气肠杆菌为研究对象，系统的检测PMQR基因，在国内首次报道在产气肠杆菌中检出qnrB、qnrS和aac(6’)-Ib-cr基因，并证实PMQR基因在喹诺酮类耐药和敏感菌株中均存在，喹诺酮类药物敏感菌株中PMQR基因的检出值得关注。　　 4．PMQR基因阳性菌株与PMQR基因阴性菌株ESBLs基因携带率有显著性差异(P＜0.01)，可能有协同耐药机制存在，有待进一步研究。