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背景:心力衰竭(HF)是一种威胁患者生命的危险疾病。中医药在治疗心衰方面有其独特的优势,本课题旨在研究活血通络中药单体丹酚酸B(SalB)及益气温阳中药制剂心脉隆(XML)治疗心衰的作用机制。实验一:丹酚酸B对心衰的作用研究目的:丹参在中国的医疗结构中广泛用于治疗心脏病。丹酚酸B是丹参的主要活性成分。本课题研究在实验性小鼠心衰模型中丹酚酸B对心衰的作用及其机制。方法:成年雄性C57/BL6小鼠,用主动脉弓缩窄(TAC)术复制压力负荷致心力衰竭模型;术后2周超声心动图检测主动脉弓压力阶差(AoPg)、心率(HR)、舒张末期左室前壁厚度(LVAWd)、舒张末期左室后壁厚度(LVPWd)、舒张末左室内径(LVIDd)、收缩末期左室前壁厚度(LVAWs)、收缩末期左室后壁厚度(LVPWs)、收缩末左室内径(LVIDs)、舒张末左室容积(EDV)、收缩末左室容积(ESV),并计算左室射血分数(EF%)、左室短轴缩短率(FS%)、左心室重量(LVW)等心脏功能学数据;术后2周解剖小鼠心脏、肺脏、肝脏及胫骨等,获得体重(BW),全心重(HW),左室重(LVW),肺脏重量(LUW),肝脏重量(LIW),胫骨长(TL),心体比(HW/BW),心胫比(HW/TL),左室胫比(LVW/TL),肺体比(LUW/BW),肝体比(LIW/BW)等解剖学数据;术后2周取材后行心肌组织HE染色,观察心肌细胞面积大小的变化及微观形态改变情况;通过Elisa法检测血浆脑钠肽(BNP)浓度;培养H9C2大鼠心肌细胞用免疫印迹(Western blot)法检测细胞外信号调节蛋白激酶l/2(ERK1/2),蛋白激酶B(AKT)和锌指转录因子结合蛋白4(GATA4)的表达。实验分组:假手术组(n=10),TAC组(n=9),TAC+MET组(美托洛尔,阳性对照药,n=9),TAC+SalB 组(SalB,240 mg·kg-1·day-1,n=9)。结果;SalB对TAC致心衰有显著的保护作用。其机制为SalB可抑制ERK1/2的Thr202/Tyr204磷酸化位点,但是对AKT第473位点无作用,SalB抑制GATA4从而抑制血浆中BNP的表达(P<0.001),改善心衰。结论:SalB通过抑制ERK1/2/GATA4信号通路改善TAC诱导的HF。实验二:心脉隆对心衰的作用研究目的:中药制剂心脉隆注射液在临床上用于治疗心衰,然而其有效机制尚不明确,本研究旨在探索XML治疗心衰的作用机制。方法:成年雄性C57/BL6小鼠,用主动脉弓缩窄(TAC)术复制压力负荷致心力衰竭模型;术后 2 周超声心动图检测 AoPg、HR、LVAWd、LVPWd、LVIDd、LVAWs、LVPWs、LVIDs、EDV、ESV,并计算EF%、FS%、LVW等心脏功能学数据;术后 2 周解剖小鼠 BW、HW、LVW、LUW、LIW、TL、HW/BW、HW/TL、LVW/TL、LUW/BW、LIW/BW、等解剖学数据;术后2周取材后行心肌组织HE染色,观察心肌细胞面积大小的变化及微观形态改变情况;培养H9C2大鼠心肌细胞用免疫印迹(Western blot)法检测细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2),蛋白激酶B(AKT)、糖原合成激酶-3 β(GSK3 β)、和锌指转录因子结合蛋白4(GATA4)的表达。实验分组:假手术组(SHAMn=10),手术组(TAC n=12),美托洛尔(MET,阳性药物治疗,n=7)和心脉隆组(XML处理,n=14)。结果:XML对TAC致心衰有显著的对抗作用。其机制为XML抑制ERK1/2,AKT和GSK3 β的磷酸化,从而抑制GATA4的表达(P<0.001),改善心衰。结论:XML能够抑制ERK1/2,AKT/GSK3 β和GATA4信号通路从而抑制TAC诱导的HF。