论文部分内容阅读
目的中药重楼为百合科植物云南重楼或七叶一支花的干燥根茎,有清热解毒,消肿止痛,凉肝定惊之功效。重楼皂苷I为重楼提取的化学成分之一,研究显示对多种肿瘤细胞有增殖抑制及促进凋亡的作用。本研究拟通过倒置显微镜下观察细胞形态、MTS比色法及流式细胞仪检测凋亡,来探讨重楼皂苷I对人黑色素瘤细胞A2058、G361的增殖抑制及促进凋亡的作用。方法1.以浓度为0μg/ml、0.625μg/ml、1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml的重楼皂苷I溶液作用于人黑色素瘤细胞A2058、G361,分别处理24h,48h,72h后用MTS法检测细胞增殖程度；2.倒置显微镜下观察重楼皂苷I作用24h,48h,72h后人黑色素瘤细胞形态的变化,并与对照组细胞作比较；3.重楼皂苷I处理人黑色素瘤细胞A2058、G361,分2组,组1：重楼皂苷I 2.5μg/ml浓度处理0h,12h,24h,48h;组2：重楼皂苷I 0μg/ml、1.25μg/ml、2.5μg/ml、 5μg/ml4个浓度,处理24h,经FITC-Annexin V/PI试剂盒染色后应用流式细胞术(FCM)检测细胞的凋亡情况。结果1.与对照组比较重楼皂苷I在0.625-10μg/ml浓度范围内对人黑色素瘤细胞A2058、G361的增殖均有抑制作用,并呈现出明显的时间剂量依赖效应关系。2.倒置显微镜下观察加入重楼皂苷I处理过的人黑色素瘤细胞形态较空白组明显不同,有伪足减少或消失、细胞变圆、皱缩漂浮等现象,且浓度越高现象越明显。3.重楼皂苷I能诱导人黑色素瘤细胞凋亡,流式检测在浓度为2.5μg/ml作用12h、24h、48h后,均可出现明显凋亡,作用时间越长,凋亡率越高。流式检测在浓度分别为1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml作用24h,均出现明显凋亡,浓度越高,凋亡率越高。结论 重楼皂苷I能抑制人黑色素瘤细胞A2058、G361增殖并能诱导其凋亡。