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目的:分析超级化激活环核苷酸调控通道基因家族-2(HCN2)mRNA在风湿性心脏病二尖瓣狭窄并发心房颤动患者组及窦性心律患者组右心耳组织中的表达,探讨HCN2mRNA在风湿性心脏病二尖瓣狭窄并发心房颤动患者右心耳的调节机制,从分子水平上为心房颤动在风湿性心脏病二尖瓣狭窄患者的发生及发展机制奠定理论基础。方法:1.收集在广西医科大学第一附属医院心胸外科住院的风湿性心脏病二尖瓣狭窄,心功能NYHAⅡ-Ⅲ级并排除其他并发症患者43例。根据我院心脏彩色多普勒超声检查及心电图结果进行分组:实验组为风湿性心脏病二尖瓣狭窄合并心房颤动患者(AF组)26例;对照组为风湿性心脏病二尖瓣狭窄并发窦性心律患者(SR组)17例。2.以HCN2基因mRNA和内参β-actin的表达量比值作为评价目的基因HCN2mRNA的表达水平,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法定性分析HCN2mRNA在风湿性心脏病二尖瓣狭窄并发心房颤动患者和风湿性心脏病二尖瓣狭窄并发窦性心律患者右心耳组织中表达的差异。3.以SYBR Premix Ex TaqTMⅡ为荧光染料,建立检测分析HCN2基因mRNA荧光相对定量聚合酶链式反应法(FQ-PCR),按2-△△CT法对HCN2基因mRNA在风湿性心脏病二尖瓣狭窄并发心房颤动患者和风湿性心脏病二尖瓣狭窄合并窦性心律患者右心耳组织中mRNA相对表达量的差异进行测量分析。4.采用SPSS16.0统计学软件对所有数据进行统计分析,所有数据均采用均数±标准差(x±s)表示,计量资料采用t检验,检验水准α=0.05。结果:1.经半定量逆转录聚合酶链反应技术研究分析结果显示,HCN2基因mRNA在风湿性心脏病二尖瓣狭窄并发心房颤动患者和风湿性心脏病二尖瓣狭窄窦性心律患者右心耳组织中均有表达,其表达量分别为0.99±0.18和0.28±0.06,两组比较差别有统计学意义(t=10.39,P<0.01),提示HCN2mRNA在风湿性心脏病二尖瓣狭窄并发心房颤动患者右心耳组织中表达上调。2.对HCN2基因及β-actin内参做标准曲线,结果显示HCN2基因与β-actin内参扩增效率及相关系数分别为E%=113.75,r2=0.997和E%=111.89,r2=0.995,提示HCN2基因和β-actin内参在右心耳组织中的扩增效率基本一致,说明该相对定量荧光定量聚合酶链式反应体系可靠。3.经相对定量荧光定量聚合酶链式反应技术研究分析结果显示,HCN2基因mRNA在风湿性心脏病二尖瓣狭窄并发心房颤动患者和风湿性心脏病二尖瓣狭窄合并窦性心律患者右心耳组织中的相对表达量分别为0.70±0.14和0.39±0.08,两组比较差别有统计学意义(t=3.31,P<0.01),提示HCN2mRNA在风湿性心脏病二尖瓣狭窄并发心房颤动患者右心耳组织中表达上调。结论:1. HCN2在风湿性心脏病二尖瓣狭窄并发心房颤动患者右心耳组织中表达明显上调,从而使超极化激活阳离子电流增大,最终导致心律失常,引起风湿性心脏病二尖瓣狭窄患者发生心房颤动。2.经PCR方法揭示,与风湿性心脏病二尖瓣狭窄并发窦性心律患者相比,合并心房颤动患者右心耳组织中HCN2基因表达明显上调,说明HCN2的表达上调在心房颤动的发生、发展全过程中起着重要的作用,可能是风湿性心脏病二尖瓣狭窄患者伴发心房颤动的分子机制。