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人脑利钠肽(Human Brain Natriuretic Peptide,hBNP)又称B型利钠肽(B-type Natriuretic Peptide),是心室分泌的具有代偿功能的一种内源性多肽,通过舒张血管,促进排钠、排尿,抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS),从而降低心脏前、后负荷,改善充血性心力衰竭(Congestive Heart Failure,CHF)患者的血流动力学指标,起到维护心功能的作用。国内外已将rhBNP(Recombinant Human Brain Natriuretic Peptide,rhBNP)列为急性心衰一线治疗药物。另外,由于心衰患者体内BNP浓度发生显著的变化,血浆中BNP含量的检测也已被国内外列为临床诊断和预后评估的重要指标。本研究主要针对以下三个部分进行探索研究。1.建立双抗体夹心酶联免疫吸附法(Sandwich Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA),用于测定rhBNP给药后,不同时间动物血药浓度的检测。并对该方法进行了优化,完成方法学验证,目前该方法已用于在研rhBNP产品临床前动物药代研究。2.hBNP与特异性受体结合,激活鸟苷酸环化酶,引起细胞内环单磷酸鸟苷(cGMP)的浓度升高,作为第二信使,cGMP在细胞内进一步发挥生物学作用。因此,测定细胞内cGMP变化,可以反应hBNP的生物学活性。该研究与中检院合作,通过建立稳定转染h BNP受体基因的单克隆细胞系,建立竞争性酶联免疫吸附法(Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA),并完成方法学验证,目前该方法已应用于rhBNP产品的生物活性检测。3.通过给新西兰兔耳缘静脉滴注戊巴比妥钠,建立新西兰兔急性心衰模型,心衰造模成功的新西兰兔给予高、中、低不同剂量的自制rhBNP,通过测定血流动力学参数以及血浆肌酸激酶和乳酸脱氢酶活性,对在研产品在动物体内的药效进行了初步研究。结果表明,在研rhBNP产品具备与原研药物相同的治疗作用。本课题的研究结果为rhBNP临床前研发工作的顺利完成打下了基础。