灵芪胶囊对人源性直结肠癌lovo细胞荷瘤裸鼠HGF/SF-met信号转导通路的影响

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:buffon149
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目的:(1)观察灵芪胶囊对人源性结、直肠癌的抑制作用;(2)观察灵芪胶囊对lovo细胞荷瘤裸鼠生命状态和免疫器官的影响。(3)探讨灵芪胶囊抑制结直结肠癌相关的肿瘤细胞信号转导通路,即HGF/c-met通路,并诱导肿瘤细胞的凋亡作用及机制。方法:体内试验:取60只裸鼠,分6组,每组10只,分别为灵芪胶囊高、中、低剂量组,阳性对照组(给予5-FU)、模型组、空白对照组。于裸鼠右侧腋部皮下接种结、直肠癌肿瘤细胞,接种后24h给药,观察裸鼠的生命体征;21天后,称取裸鼠体重,麻醉,摘眼球取血,离心,取血清以备用;取肿瘤组织并称重,计算抑瘤率:取脾脏,计算免疫指数;并取瘤块在固定液中进行固定,在透射电镜下观察肿瘤细胞的生长情况;流式细胞术观察肿瘤细胞的凋亡情况。应用Western-Blot法和RT-PCR法检测信号转导通路HGF/SF-c-met上的关键位置HGF、c-met及PTK的mRNA及蛋白含量,以评价灵芪胶囊对该通路的影响方式结果:灵芪胶囊对人源性lovo细胞荷瘤裸鼠具有一定的抑制作用,而且对荷瘤裸鼠的生命状态及免疫系统影响较小。透射电镜表明灵芪胶囊对lovo细胞形态学有一定的影响,流式细胞仪检测说明灵芪胶囊能够诱导肿瘤细胞发生凋亡,其中灵芪胶囊高剂量组凋亡率最高,为34.76%,与对照组比较差异具有显著性意义。应用Real-time PCR及Western blot技术和激光共聚焦显微镜针对肿瘤凋亡相关的HGF/SF-met通路进行研究,结果表明,灵芪胶囊诱导肿瘤细胞发生凋亡的作用与该通路相关,能够抑制直结肠癌中HGF与c-met的联合表达,从而抑制HGF/SF-met通路诱导肿瘤细胞的凋亡结论:灵芪胶囊对人源性直结肠癌lovo细胞荷瘤裸鼠具有一定的肿瘤生长具有一定的抑制作用,能够诱导lovo细胞凋亡发生。其作用机制可能与HGF/SF-met信号转导通路有关,通过抑制HGF/SF-met信号转导通路上的关键位置HGF、PTK、c-met,从而抑制HGF/SF-met信号转导通路,达到抑制直结肠癌的作用。为今后临床上抗肿瘤提供了新的思路和理论依据。
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