研究背景雌激素受体(Estrogen receptor,ER)是调控乳腺癌发展过程的一个重要分子。依据转录基因的不同,雌激素受体主要分为ERα与ERβ两种亚型。ERα又分为ERα66、ERα46、ERα36三种剪切变异体。ERα66即经典的雌激素受体,其与乳腺癌的关系已被深入研究,已成为临床乳腺癌进行内分泌治疗的重要标志物。ERα36,是近年来发现的经典雌激素受体ERα的剪切变异体。许多研究表明,ERα36促进乳腺癌的侵袭转移并且在内分泌治疗抵抗中发挥重要作用。ERβ具有5种剪切变异体,已有研究表明,ERβ对乳腺癌的发展具有抑制作用,但其机制还不明确。ERβ与ERα36在乳腺癌中可能发挥相反的作用,但两者的表达对乳腺癌的预后意义尚未被系统研究。文献报道,ERα36促进乳腺癌细胞的增殖和侵袭主要机制之一是能够激活PI3K/AKT通路,而ERβ能通过上调PTEN而对PI3K/AKT信号通路发挥负调控作用。然而,ERβ能否通过抑制PI3K/AKT通路的激活来降低ERα36对乳腺癌的促进作用尚待实验证明。研究目的1.阐明ERβ与ERα36在乳腺癌组织中的表达与预后的关系;2.明确ERβ能够上调PTEN而阻断ERα36对PI3K/AKT通路的激活,从而抑制乳腺癌细胞的增殖。研究方法1.通过免疫组化方法检测乳腺癌组织标本中ERβ和ERα36的表达,分析其表达与预后的关系。2.通过免疫组化方法检测乳腺癌组织标本中PTEN的表达,分析其表达与ERβ表达以及与预后的关系。3.在乳腺癌细胞中激活ERβ,检测PTEN蛋白表达的改变和AKT磷酸化的改变。研究结果1.ERβ和ERα36的表达在乳腺癌组织中呈负相关,两者结合能更好地判断乳腺癌的预后。(1)ERβ和ERα36的表达在乳腺癌组织中呈负相关关系(r=-0.42,P<0.01)。(2)ERβ的表达与较早的临床分期(P=0.003)、较少的淋巴结转移有关(P=0.007)。ERα36的表达与较晚的临床分期(P=0.001)和较大肿瘤大小有关(P=0.029)。(3)ERβ阳性患者较阴性患者具有更高的无病生存率(P=0.005),而ERα36高表达较低表达患者则有较低的无病生存率(P=0.029)。ERβ阴性/ERα36阳性患者的无病生存率较其他分组患者更低(P=0.018)。(4)Cox风险模型分析表明,淋巴结转移阳性、ERα36表达阳性是乳腺癌患者发生复发、转移的独立风险因素。(HR=0.336,P=0.026;HR=2.737,P=0.029)。2.ERβ抑制乳腺癌细胞增殖的可能机制(1)ERβ和PTEN的表达在乳腺癌组织中呈正相关(r=0.68,P<0.01)。(2)在乳腺癌细胞中激活ERβ后,PTEN的表达增加,AKT的磷酸化减弱,从而抑制乳腺癌细胞的增殖。结论ERβ与ERα36在乳腺癌组织中的表达呈负相关,ERβ阳性的患者无病生存率较高,ERα36阳性的患者无病生存率较低,两者结合起来能够更好地判断患者的预后。ERβ与PTEN在乳腺癌组织中的表达呈正相关,且在乳腺癌细胞中激活ERβ,可上调PTEN的表达,减弱AKT的磷酸化,抑制乳腺癌细胞的增殖作用。