论文部分内容阅读
红树内生真菌和水生真菌是近年来国内外研究的热点,它们能产生众多活性较强、骨架新颖的化合物,其次级代谢产物在免疫调节剂、抗肿瘤、抗氧化、治疗心脑血管疾病等领域有应用价值。本论文通过研究红树内生真菌和水生真菌的次级代谢产物,为先导化合物的开发提供了一定的理论基础。本文总共采集了 10种来自广西北仑河口国家级自然保护区中的红树植物(秋茄、木榄、海漆、白骨壤、海芒果、银叶树、黄槿、卤厥、苦郎树、桐花树)。按照无菌操作对每种植物的叶片、茎组织进行内生真菌的分离纯化,最终总共分离纯化得到40株红树内生真菌。选取三株红树内生真菌(efKcY2041、efAiJ2043、efHtY2041)进行固体发酵培养,室温静置40d,将发酵好的菌体用甲醇浸泡三次,纱布过滤,浓缩浸泡液,50℃下旋蒸得到浸膏,利用硅胶柱层析、重结晶、凝胶Sephadex LH-20等多种分离手段,通过质谱、核磁等波谱技术,总共分离鉴定了 20个化合物,结构分别为:豆甾醇、麦角甾-7,22(E)-二烯-3β,5α,6β-三醇、1,8-二羟基-3-甲基蒽醌、甘露醇、丁二酸、草酸、十四烷酸、12-羟基十八烷酸、硬脂酸、吲哚-3-乙酸、原儿茶酸、对羟基苯甲酸、苯甲酸、肉桂酸、水杨酸、2-甲基-6-羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸乙酯、对苯二酚、对羟基苯甲醛、4-羟基-3-甲氧基苯甲醛。选取两株水生真菌(LC1701、LC1715)进行固体发酵培养,室温静置40d,用乙酸乙酯萃取浸膏,将得到的浸膏利用硅胶柱层析、重结晶、凝胶Sephadex LH-20等多种分离手段,通过质谱、核磁等波谱方法,总共分离鉴定了 14个化合物,结构分别为:大黄素、β-谷甾醇、胆甾醇、对羟基苯甲酸甲酯、对苯二甲酸二甲酯、3-羟基-4-甲氧基苯甲酸甲酯、对羟基苯丙酸、对甲氧基苯乙酸、吡啶-3-甲酸、对羟基苯乙酰胺、乙酰苯胺、对甲氧基苯酚、对羟基苯乙醇、4-羟基-3-甲氧基苯乙酮。从分离到的34个化合物中选取18个活性物质,虚拟筛选结果显示与这些化合物关联性较强的靶标为NOS、SAMDC、GSTs、MIF、ODC、MAPK、CYP450,它们是与抗炎、抗肿瘤、细胞分化、解毒系统、免疫疾病、药物代谢相关的蛋白酶,从而明确了化合物分子产生药理活性的作用机理,为海洋药物的开发提供了一定的理论指导。