论文部分内容阅读
目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitor factor ,MIF)和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)在胰腺癌组织及细胞中的表达及其与胰腺癌临床病理特征的关系及意义。方法免疫组织化学、Western blot和RT-PCR方法检测MIF、CyclinD1在胰腺癌和癌旁组织的表达情况;人工化学合成MIF siRNA和对照siRNA,将其转染Panc-1、Bxpc-3胰腺癌细胞株;RT-PCR检测MIF和CyclinD1 mRNA;Western blot检测MIF、CyclinD1蛋白的表达。分析MIF、CyclinD1的表达与胰腺癌临床病理特征的关系。结果MIF和CyclinD1在胰腺癌组织中的表达明显高于癌旁组织及正常胰腺组织。胰腺癌组织中MIF和CyclinD1 mRNA的表达较癌旁组织高。MIF siRNA以浓度50nMol/L和100nMol/L转染胰腺癌细胞株PANC-1和Bxpc-3,并以对照siRNA转染PANC-1和Bxpc-3做阴性对照。在50nMol/L MIF siRNA干预组中,PANC-1细胞MIF和CyclinD1 mRNA的表达分别下调(54.2±3.7)%和(32.0±5.0)% ;MIF和CyclinD1蛋白的表达分别下调(44.0±1.6)%和(39.8±2.0)%。Bxpc-3细胞MIF和CyclinD1 mRNA的表达分别下调(42.0±2.1)%和(40.6±7.0)%;MIF和CyclinD1蛋白的表达分别下调(37。8±0.7)%和(48.1±1.8)%。在siRNA处理的PANC-1和Bxpc-3细胞中,MIF、CyclinD1mRNA和蛋白表达的下调值与对照siRNA组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。在100nMol/L MIF siRNA干预组中,PANC-1细胞MIF和CyclinD1 mRNA表达分别下调(86.5±3.7)%和(73.0±3.0)%;MIF和CyclinD1蛋白表达分别下调(94.0±4.0)%和(85.9±1.1)%。Bxpc-3细胞MIF和CyclinD1 mRNA表达分别下调(88.0±1.0)%和(63.8±6.0)%;MIF和CyclinD1蛋白表达分别下调(87.6±1.3)%和(73.6±3.7)%。在siRNA干预的PANC-1和Bxpc-3细胞中,MIF、CyclinD1 mRNA和蛋白表达的下调值与对照siRNA组相比,差异有显著统计学意义(P<0.01)。MIF siRNA 50nMol/L干预组与100nMol/L干预组相比较,MIF、CyclinD1 mRNA和蛋白在PANC-1和Bxpc-3中的表达差异也有统计学意义(P<0.01)。89例胰腺癌组织中MIF和CyclinD1阳性表达率分别为88.8%和50.6%。临床分期I、II、III、IV期病例中MIF表达率分别为69.2%、94.7%、96.4%、100%,I期与各期之间表达率的差异均有统计学意义(p<0.05),II期与III、IV期及III期与IV期之间的差异均没有统计学意义;CyclinD1各临床分期表达率分别为30.8%、47.4%、33.3%、68.8%。I期表达率与III、IV期之间的差异均有统计学意义(p<0.05),与II期之间的差异无统计学意义,II期与III期之间的表达差异有统计学意义(p<0.01),II期与IV期及III期与IV期之间的的表达差异无统计学意义。MIF表达与CyclinD1表达呈正相关关系(p<0.05)。伴有淋巴结转移的病例中MIF和CyclinD1阳性表达率(97.5%和62.5%)均高于无淋巴结转移的胰腺癌组织(81.6%和40.8%),差别均有统计学意义(p<0.05)。发生肝转移的胰腺癌组织中MIF表达率高于无肝转移组织(100% versus 85.9%,p>0.05), CyclinD1表达率显著高于无肝转移组织(66.7% versus 46.5%,p <0.05)。高、中、低分化组胰腺癌组织中MIF和CyclinD1阳性表达率分别为61.9%、73.8%、96.2%和28.6%、45.2%、76.9%,三组之间的差异均有统计学意义(p<0.05)。结论腺癌组织中高表达MIF、CyclinD1 mRNA和MIF、CyclinD1蛋白; MIF siRNA能特异性阻断PANC-1及Bxpc-3细胞MIF mRNA和蛋白的表达,并且同时有效下调CyclinD1 mRNA和蛋白的表达。MIF和CyclinD1过表达与胰腺癌的临床分期、淋巴结和肝转移及组织分化密切相关。MIF和CyclinD1的过表达可能与胰腺癌的发生、发展、转移有关。