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第一部分：高压氧联合神经干细胞移植更好地改善了局灶性脑缺血大鼠空间记忆功能 目的：探讨高压氧(HBO)联合侧脑室神经干细胞(NSCs)移植对大脑中动脉阻塞大鼠空间记忆功能的影响。 方法：清洁级雄性SD大鼠60只，体重250-300g，随机分为5组(n=12)：假手术组(sham组)、模型组(MCAO)、高压氧组(HBO组)，神经干细胞移植组(NSCs组)与高压氧+神经干细胞移植组(HBO+NSCs组)。各组按改进的Longa法制作大脑中动脉阻塞模型，sham组缺血1min后即开放血流，其它5组均缺血1.5h后再灌注。再灌注24h后，sham组、MCAO组与HBO组侧脑室注射NSCs培养基5μl，NSCs组与HBO+NSCs组则注射5μlNSCs悬液(制备于出生24h内的SD大鼠海马，浓度1×106/μl)。侧脑室注射后2h，HBO组与HBO+NSCs组开始每天1h的高压氧(HBO)治疗，其余3组仅吸空气，治疗连续7天。第9天起，各组均行5天的Morris水迷宫实验，记录各组大鼠寻找平台平均潜伏期、穿越平台次数、跨越目标象限时间占整个游泳时间百分率及跨越目标象限距离占整个游泳距离百分率。测试结束后立即处死大鼠，收集海马标本，检测各组大鼠海马ChAT活力的变化胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性及脑源性神经营养因子(BDNF)与血管内皮生长因子(VEGF)含量。 结果：与MCAO组相比，NSCs组、HBO组和HBO+NSCs组寻找平台平均潜伏期显著缩短(P<0.05)，穿越平台次数、跨越目标象限时间占整个游泳时间百分率及跨越目标象限距离占整个游泳距离百分率行为学指标均明显改善(P<0.05)。但与HBO+NSCs组相比，NSCs组和HBO组行为学表现均明显不及(P<0.05)。与MCAO组相比，NSCs组、HBO组和HBO+NSCs组海马ChAT活力及BDNF与VEGF的含量显著上升(P<0.05)，但与HBO+NSCs组相比，NSCs组和HBO组海马ChAT活力及BDNF与VEGF的含量明显较低(P<0.05)。 结论：高压氧联合神经干细胞移植较单独高压氧、干细胞移植，更好地改善了局灶性脑缺血再灌注后大鼠记忆功能，这可能与联合治疗更好地促进了海马ChAT活力及BDNF与VEGF的表达有关。 第二部分：高压氧促进了绿色荧光蛋白标记神经干细胞在局灶性脑缺血大鼠脑组织中的迁移 目的：探讨高压氧(HBO)对绿色荧光蛋白(GFP)标记神经干细胞(NSCs)在局灶性脑缺血大鼠脑组织迁移的影响并对其机制进行分析。 方法：清洁级雄性SD大鼠39只，体重250-300g，随机分为3组(n=13)：GFP-神经干细胞移植组(组Ⅰ)，高压氧+GFP-神经干细胞移植组(组Ⅱ)与常压氧+GFP-神经干细胞(组Ⅲ)。各组按改进的Longa法制作大脑中动脉阻塞模型，各组均缺血1.5h后再灌注。再灌注24h后，各组经侧脑室注射GFP标记的NSCs悬液5μl(浓度1×106/μl)。侧脑室注射后2h，组Ⅱ开始每天1h的高压氧(HBO)治疗；组Ⅲ则常压下吸95％的氧气；组Ⅰ仅吸空气，各组治疗连续7天。第9天，处死大鼠。收集海马标本，检测各组大鼠海马caspase-3及脑源性神经营养因子(BDNF)与血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达量，并行脑组织冰冻切片，荧光显微镜下观察细胞的迁移情况。 结果：与组Ⅰ和组Ⅲ相比，组Ⅱ海马caspase-3含量明显减少(P<0.05)，同时组Ⅲ海马caspase-3含量也低于组Ⅰ(P<0.05)。与组Ⅰ和组Ⅲ相比，组Ⅱ海马BDNF与VEGF的表达量升高；但与组Ⅰ相比，组Ⅲ海马BDNF与VEGF的也是增高的(P<0.05)。与组Ⅰ和组Ⅲ相比，组Ⅱ缺血区GFP-阳性细胞数明显升高；但与组Ⅲ相比，组Ⅰ缺血区GFP-阳性细胞数明显不及(P<0.05)。 结论：HBO可以更好的促进GFP-标记的NSCs在MCAO模型大鼠脑组织内的迁移，其促迁移机制可能与HBO可以促进BDNF与VEGF的分泌，抑制新生细胞的凋亡有关。