复合酶酶解假酸浆黄酮苷的研究

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本文研究了利用酶法酶解假酸浆提取物制取总黄酮苷元的最佳工艺条件及其抗氧化活性能力,并采用薄层色谱法(TLC)对酶解产物中总黄酮进行了分离,利用高效液相色谱-质谱联用技术对其鉴定分析。酶作用的研究结果显示,复合酶去糖基化作用的最佳工艺条件为:pH为假酸浆提取物的自然pH值,酶解温度为40℃,含酶量为纤维素酶和果胶酶各0.5%,酶解时间4h;通过对DPPH自由基、羟自由基及超氧阴离子自由基清除能力实验,酶解液抗氧化性能显著高于假酸浆提取液;酶解液的薄层及HPLC-MS法初步鉴定出假酸浆中含有桑色素、二氢槲皮素和儿茶素三种黄酮。论文主要内容如下:1.首先,通过单因素及正交试验研究得到纤维素酶和果胶酶水解假酸浆提取物的最佳工艺条件,测出了还原糖含量的提高增加。研究发现两种酶复合作用效果明显优于两种酶的单独作用。2.其次,通过实验测定了假酸浆中所含的主要成分,采用双氧水法、无水乙醇法和AB-8柱吸附法对假酸浆黄酮进行了脱色实验.帮助更好的分离纯化假酸浆中的总黄酮。3.研究了酶解假酸浆总黄酮苷清除DPPH自由基、羟自由基及超氧阴离子自由基的能力。在此基础上,可以进一步研究使用酶法改性技术生产抗氧化性能力更强的假酸浆黄酮苷元产品。4.对复合酶酶解的假酸浆提取物纯化处理后采用薄层色谱法分离出了四种总黄酮,对其进行液-质联用分析,参照比较相对分子质量初步鉴定出其三种为桑色素(338)、二氢槲皮素(304.25)和儿茶素(308.28)。
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