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柑橘黄龙病（Citrus Huanglongbing，HLB）是世界性柑橘生产上的毁灭性病害。易与其混合发生的几种柑橘病毒病及类似病害主要包括衰退病、裂皮病和碎叶病；病原分别为Citrus tristeza virus（CTV），Citrus exocortis viroid（CEVd），Citrus tatter leaf virus（CTLV）。本研究主要以HLB病菌、CTV、CEVd、CTLV为对象，从生物学角度及分子水平上对其部分特性进行研究；目的是建立上述4种病原的高灵敏度的分子检测技术体系；在分子水平上明确其部分分子特性。另外初步探讨运用超低温技术脱除HLB病菌、CTV、CEVd的可能性及机理。主要获得结果如下： 1．HLB病菌生物学鉴定及PCR检测体系优化。以长春花和椪柑为指示植物，部分待检材料表现了明显HLB症状。通过对影响PCR技术的各个主要因素的调整，建立了HLB病菌PCR、Semi-Nested PCR及Nested-PCR检测技术；并对三种方法的检测灵敏度进行比较，结果发现Semi-Nested PCR及Nested-PCR检测灵敏度远高于常规PCR，是常规PCR的104倍。运用Nested-PCR技术在黄皮上检测出HLB病菌（Candidatus Liberobacter asiaticus），在国内外属于首次报道。 2．不同引物检测HLB病菌灵敏度比较。对基于rplA／rplK，β-operon，16SrDNA和16S／23SrDNA不同基因组序列设计的5对引物依次为fP400／rP400，fP535／rP535，fA2／rJ5，fOI1／rOI2c，fOI2／r23S1检测HLB病菌灵敏度进行了比较，结果发现不同引物检测灵敏度不一样，其检测灵敏度由高到低依次为：fP400／rP400＞fP535／rP535＞fA2／rJ5＞fOI1／rOI2c＞fOI2／r23S1。 3．HLB菌亚洲株系分子鉴定。HLB病菌16SrDNA片段RFLP-SSCP分析及基于16SrDNA序列中国柑橘黄龙病菌属分类地位的确立，分析结果显示来自中国7省区9个代表性的分离物16SrDNA高度保守，全部属于亚洲菌系（Candidatus Liberobacter asiaticus）。HLB病菌16S／23SrDNA间区序列分析及系统进化树分析结果显示：来自中国7省区分布在不同的寄主体内、导致寄主表现不同症状的18个分离物在该区段没有发生显著变异，各分离物之间的同源性达99％以上，全部与亚洲菌系（Candidatus Liberobacter asiaticus）高度同源，而与非洲菌系（Candidatus Liberobacter africanum）差异较大。 4．HLB病菌Southern blotting检测。利用α-32P-dCTP标记16SrDNA探针进行HLB病菌Dot-blotting检测，结果发现Dot-blotting检测灵敏度高于常规PCR而低于Semi-Nested PCR及Nested-PCR，最低检测下限为30fg总核酸。 5．CTV生物学鉴定、RT-PCR检测技术的建立及来自不同寄主的21个分离物3’端、5’端分子特性分析。以墨西哥莱檬和甜橙为指示植物，待检样品表现典型的CTV致病症状。核苷酸序列多重比对分析结果显示：21个CTV分离物的5’端和3’端共4个变异区（A区，F区，CP，P20）存在明显的差异。A区的核苷酸序列