【摘 要】
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【目的】研究Smad4失活和KrasG12D活化对结肠癌CT26细胞肝转移的协同效应。【方法】利用RNAi技术敲减CT26细胞Smad4的表达,建立稳定的CT26-Smad4KD细胞系。用MTT法检测Smad4
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【目的】研究Smad4失活和KrasG12D活化对结肠癌CT26细胞肝转移的协同效应。【方法】利用RNAi技术敲减CT26细胞Smad4的表达,建立稳定的CT26-Smad4KD细胞系。用MTT法检测Smad4低表达对CT26细胞增殖的影响。将CT26细胞,转染了空载体的CT26-Vector细胞以及CT26-Smad4KD细胞分别接种至Balb/c裸鼠皮下,4周后处死裸鼠,通过测量肿瘤体积的大小,观察Smad4低表达以后对CT26细胞成瘤能力的影响。划痕实验(Wound-Healing Assay)比较Smad4低表达对CT26细胞迁移能力的影响。【结果】RNAi技术能够稳定有效的敲减Smad4的表达,其效率在85%以上。CT26细胞经TGF-β处理后增殖速度要慢于未经处理的细胞,P<0.05;经TGF-β处理后CT26-Smad4KD细胞增殖要快于其对照组细胞,P<0.05。Balb/c裸鼠皮下成瘤实验证实CT26-Smad4KD细胞形成的肿瘤较对照组小约50%,P<0.05。划痕实验表明在TGF-β作用下CT26细胞的迁移快于未经处理的细胞,而CT26-Smad4KD细胞的迁移速率慢于其对照组细胞。【结论】TGF-β能够抑制CT26细胞的增殖,而Smad4低表达能够拮抗这一作用。Smad4敲减能够抑制CT26细胞在裸鼠皮下的肿瘤形成。Smad4低表达能够拮抗TGF-β对CT26细胞迁移的诱导作用。
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