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目的本实验旨在通过观察不同孔径丝素蛋白支架在SD大鼠体内不同时间点的降解情况,初步了解不同孔径丝素蛋白材料在体内降解过程中的形态学特点,研究丝素蛋白材料的结构对其体内降解的影响,为深入研究丝素蛋白材料体内降解的可控性奠定实验基础。材料与方法1.制备三种丝素蛋白膜,平均孔径分别为20±1.5μm(SF-1).100士8μm(SF-2).200±15μm(SF-3),平均孔隙率分别为86.8±0.2％(SF-1).92.4±0.1％(SF-2).96.6±0.1％(SF-3),扫描电镜观察其表面结构。2.选用体重相当的SD大鼠,全麻下在其脊柱两侧共作3个长约1cm的小切口,潜行分离,每只SD大鼠形成3个皮下囊状腔隙,随机分别植入SF-1、SF-2、SF-3。3.术后选取2,6,12,18,24及30周六个观测时间点,随机取材,分别进行大体观察、组织病理切片HE染色、Masson染色、扫描电子显微镜观察。结果1.大体标本观察可见,SD大鼠术区均无感染、坏死,伤口愈合好。整个实验过程中,SF-1与周围组织轻度粘连,易于分离,材料体积及外形无明显变化；SF-2术后第6周开始发现材料变薄,部分降解,从12周到30周材料与周围皮下组织粘连紧密,30周降解约40%；SF-3术后第2周出现降解,12周降解约50%,24周时基本找不到单纯材料存在,30周已完全降解。2.组织病理切片HE染色：SF-1：术后2周,材料表面可见巨噬细胞及较多中性粒细胞浸润,术后6周开始炎性细胞明显减少,在整个实验过程中丝素蛋白支架与周围组织界限清楚,内部未见组织长入。SF-2：术后2周,材料表面发现有成纤维细胞浸润生长,周围组织呈增生性改变.可见炎性细胞浸润,以淋巴细胞和巨噬细胞为主,偶可见新生血管形成。随着时间延长,炎性细胞减少,成纤维细胞增多,同时可见血管、组织细胞进一步长入材料。SF-3：术后2周与SF-2在2周时表现基本相同,但材料表面组织细胞浸润较深：术后6周,材料内部部分区域嗜伊红染色消失,支架结构有崩解现象,炎性细胞明显减少,可见较多血管及成纤维细胞,成纤维细胞等组织细胞逐渐深入材料内部生长；术后12周,可见较多成熟血管及成纤维细胞,材料边缘部分区域支架结构崩解现象较前明显,出现较大孔径,但内部变化不大,组织细胞进一步长入材料,但组织增生现象仍较明显；术后18周与12周所见基本相同,组织细胞进一步长入材料；术后24周,材料支架结构完全崩解,见不到正常材料结构,组织细胞与剩余材料混合存在,无明细界限。3. Masson三色染色：SF-1周围组织纤维化,整个观察周期内未见胶原纤维长入材料内部；SF-2在18周时可见较多胶原纤维深入材料内部,30周时可见整个残余材料被胶原纤维包绕；SF-3在2周时可见边缘结构模糊,周围被胶原纤维包绕,6周时可见大量胶原纤维组织深入内部生长,血管丰富,24周时可见大量胶原纤维将残余丝素蛋白支架分区包绕。4.扫描电子显微镜(SEM)观察：SF-1在18周时可见表面出现孔径塌陷,但直到30周,未观察到材料断面结构有新的变化；SF-2在2周时材料孔内出现组织细胞,12周时孔径变大,部分孔径塌陷,较多组织细胞长入,24周时整个断面结构塌陷；SF-3在2周时表面可见片状材料碎屑及孔径塌陷,局部孔径增大,断面结构未见明显变化,12周表面孔径完全塌陷,可见较多组织细胞长入,24周时已找不到正常材料结构。结论1.不同孔径、孔隙率的丝素蛋白支架体内降解速率不同。2.三种丝素蛋白支架体内降解速率SF-3>SF-2>>SF-1。3.植入早期丝素蛋白支架主要被炎性细胞及成纤维细胞浸润,晚期主要为成纤维细胞,并可见胶原纤维包绕、长入材料。