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背景:心肌梗死(Myocardial Infarction,MI)是由多种因素引起的冠状动脉堵塞、血流障碍,并最终导致心肌细胞因缺血缺氧大量死亡的综合征。随着科技的发展、人们生活水平的提高,心肌梗死的发病率呈逐年上升趋势。目前临床上有效的治疗手段是冠状动脉再通,但是在冠状动脉再通时会发生缺血-再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)损伤。I/R损伤会造成细胞死亡程序的激活,包括凋亡(细胞核断裂、质膜分离、细胞皱缩、线粒体膜完整性缺失),自噬相关的细胞死亡(胞质空泡形成、细胞器减少等),坏死(细胞和细胞器进行性肿胀、质膜破裂、蛋白酶和溶菌体渗透到细胞外)。I/R损伤是一个多因素参与的复杂的过程,比如钙超载、氧化应激、线粒体功能障碍、细胞凋亡以及炎症等均参与其中。在心脏I/R损伤早期,外周血白细胞,包括巨噬细胞和单核细胞,会迅速募集到缺血部位,参与炎症反应。前期研究结果表明,在心脏发生I/R损伤时,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)可以诱导心肌细胞凋亡,调控巨噬细胞的迁移,并且促进炎性因子的分泌。我们构建了靶向TRAIL的抗体融合蛋白-sDR5-Fc。结果显示,sDR5-Fc可以保护Wistar大鼠心脏I/R损伤,但具体的机制尚不明确。本研究中,我们首先明确sDR5-Fc是否通过调控巨噬细胞发挥心脏保护作用,进而对分子机制进行深入探讨。目的:通过体内外实验,揭示巨噬细胞在sDR5-Fc减轻心脏I/R损伤中的作用及机制。方法:体内研究中,通过建立Wistar大鼠心脏I/R损伤模型,免疫组化检测巨噬细胞在心脏的浸润情况及加入sDR5-Fc治疗后,巨噬细胞在心脏的浸润情况;通过qPCR检测心脏趋化因子及其受体的表达情况;利用氯膦酸盐脂质体进行Wistar大鼠体内巨噬细胞耗竭实验,并用流式细胞术检测体内巨噬细胞耗竭情况,通过TTC染色及免疫组化实验证明sDR5-Fc的心肌保护作用依赖于巨噬细胞;体外研究中,利用Transwell系统检测TRAIL对NR8383巨噬细胞系及原代细胞BMDM的趋化作用;通过建立H/R损伤模型,用qPCR方法检测炎症因子、趋化因子及其受体的表达情况。结果:Wistar大鼠心脏I/R损伤建立后,免疫组化实验结果显示,巨噬细胞在损伤的心肌组织浸润增多;sDR5-Fc治疗后,巨噬细胞的浸润明显减轻,并且心脏的趋化因子及其受体的表达明显降低。同时,流式细胞术证明Wistar大鼠体内巨噬细胞耗竭成功,TTC染色结果证明sDR5-Fc的心脏保护作用具有巨噬细胞依赖性;接着在体外用TRAIL诱导大鼠巨噬细胞系NR8383细胞发生趋化,应用sDR5-Fc后,NR8383细胞的趋化减少;同时,qPCR结果显示,NR8383细胞H/R损伤模型中,趋化因子及其受体、相关炎症因子的表达均明显降低。结论:sDR5-Fc能够减轻心脏I/R过程中由巨噬细胞介导的炎症反应,从而发挥心肌保护作用。