【摘 要】
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近些年来，随着人们生活习惯逐渐趋向于西方化饮食，以脂肪、糖类为代表的高热量食物和饮料所占比例明显增加，导致了超重与肥胖者日益增多，脂肪肝、高血压、2型糖尿病（type 2 diabet
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近些年来，随着人们生活习惯逐渐趋向于西方化饮食，以脂肪、糖类为代表的高热量食物和饮料所占比例明显增加，导致了超重与肥胖者日益增多，脂肪肝、高血压、2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）及心脑血管疾病等代谢性疾病的发病率呈逐年上升的趋势，而糖尿病的发病机制尚未完全清晰。目前国内外有关糖尿病的研究，多以动物模型和孔板模型作为研究载体，存在一定的研究局限。因此，本实验以微流控芯片作为技术平台，构建了脂肪组织与三维大鼠胰岛细胞瘤细胞（INS-1细胞）共培养模型，通过在培养体系中加入脂多糖（LPS），实现模拟内毒素血症内环境，达到构建糖尿病病理模型的目的。 本实验中使用光刻胶技术制作微流控芯片模板，以聚二甲基硅氧烷（PDMS）为芯片制作材料。该芯片由两部分构成——上游芯片与下游芯片，上游芯片为脂肪组织培养芯片，在培养池中将脂肪组织进行悬浮培养；下游芯片为INS-1细胞培养芯片，培养液经由上游芯片脂肪培养池流出，流入INS-1细胞三维培养池上方，透过聚碳酸酯膜与混有INS-1细胞的基底膜样物质（BME）进行物质交换。本实验通过机械法获取大鼠原代脂肪组织，通过油红O染色进行脂肪组织鉴定。使用基底膜样物质作为细胞外基质（ECM）的替代物，将INS-1细胞包裹于BME中接种于下层INS-1细胞培养室中进行三维培养，模拟胰岛细胞在体内的生长方式。将培养液在注射泵的推动下，以1.0μL/min的流速从上游芯片进样口缓慢通入，构建脂肪组织与胰岛细胞共培养模型。实验中分为空白组、LPS组、脂肪组、脂肪+LPS组四组，对脂肪组织与INS-1细胞进行了活死染色鉴定，对培养液中炎症因子IL-6、胰岛素的动态变化水平进行测量。 本实验成功构建了糖尿病微流控芯片模型，该模型可用于模拟内毒素血症及肥胖导致胰岛细胞的损伤，同时能够检测细胞因子随时间的动态变化水平，为研究2型糖尿病的发病机制奠定了一定的体外模型基础。 共培养微流控芯片;大鼠胰岛细胞瘤细胞（INS-1）;脂多糖;肥胖2型糖尿病
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