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研究目的：microRNA(miRNA)是一类小的、内源性调节多种生物作用的非编码RNA,其可以参与调节细胞分化、增殖和死亡等。最近的研究发现miRNA在多种肿瘤中存在异常表达,并且在肿瘤的形成、进展、耐药性中发挥重要的作用。其中let-7a和miR-21在人类多种恶性肿瘤中都被发现有异常表达。本研究拟首先检测let-7a和miR-21在乳腺癌组织和癌旁组织中表达差异,乳腺癌的诊断提供新的标记。然后改变let-7a和miR-21在乳腺癌细胞中的表达,通过检测细胞生物学特性的改变和对靶基因表达的影响,研究这两个miRNA在乳腺癌细胞发生发展中的可能作用机制,探讨let-7a和niR-21在乳腺癌诊断与治疗中的应用价值。研究方法：(1)收集30例人乳腺癌组织及其周围癌旁组织(距离癌灶5 cm以上),术中取材后放入-80℃低温冰箱保存；(2)利用实时荧光定量PCR技术,分别检测乳腺癌组织及癌旁组只中let-7a和miR-21的表达水平,统计分析这两个miRNA在癌组只和癌旁组织中表达的差异；(3)用脂质体法将let-7a和miR-21的模拟物(let-7 a mimics和 niR-21 mimics)及其抑制剂(let-7a inhibitor和miR-21 inhibitor)分别转染乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MIB-231检测转染后细胞增殖和迁移等生物学特性的变化；(4)利用生物信息学方法分别预测let-7a和miR-21的靶基因；利用western蛋白印迹实验检测乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231分别转染let-7a和miR-21的模拟物及其抑制剂后高迁移率族蛋白Al (high mobility group protein A1,HMGA1)和信号传导与转录激活因子3 (Signal Transducer and Activator of Transcription3, STAT3)蛋白水平的改变,确定let-7a与HMGA1以及miR-21与STAT3的靶向调控关系。研究结果：(1)通过荧光定量PCR检测,乳腺癌组织中let-7a的表达明显低于癌旁组织(P<0.001),而miR-21的表达明显高于癌旁组织(P<0.05)；(2)MTT增殖实验、平板克隆实验、划痕实验和Transwell迁移实验的结果显示,与对照组比较,乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231转染let-7a mimics或miR-21 inhibitor后,细胞的增殖能力、克隆能力及迁移能力受到了抑制,转染let-7a inhibitor或miR-21 mimics后,细胞的增殖能力、克隆能力及迁移能力有所增强；通过对各组进行统计学分析均具有统计学意义(P<0.05)；(3)通过生物信息学方法分别预测let-7a和miR-21的靶基因,经、vestern蛋白印迹实验检测其蛋白水平。当乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231转染let-7a mimi cs后HMGA1蛋白表达下调；转染let-7a inhibitor后HMGAI蛋白表达上调；当乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231转染miR-21 mimics后STAT3蛋白表达下调；转染 miR-21 inhibitor后STAT3蛋白表达上调。结论：(1)在乳腺癌组织中,let-7a表达降低,miR-21表达增高,表明其可能在乳腺癌发生发展中有重要作用；let-7a和miR-21表达的检测有可能作为肿瘤的诊断和鉴别诊断指标；(2)乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231在增殖、迁移等方面受let-7a的负性调控,受miR-21的正性调控；(3)let-7a可通过作用于HMGA1发挥其对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231的调控作用；miR-21可通过作用于STAT3发挥其对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231的调控作用。