实时荧光定量PCR检测白血病MDR1及WT1基因表达

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目的 1、建立实时荧光定量PCR检测MDR1和WT1 mRNA的方法。 2、检测各类型白血病患者MDR1和WT1基因表达水平的差异。 3、探讨急性白血病初发时MDR1和WT1表达量与患者性别、临床特征、CD34抗原表达与否的关系及MDR1和WT1表达量的相关性, 4、探讨急性白血病发病时MDR1和WT1基因表达量同首次化疗效果之间的关系。 5、探讨MDR1和WT1基因表达水平在发病及缓解期的变化,了解MDR1和WT1基因表达量在白血病病程中变化,探讨MDR1和WT1基因表达水平对白血病预后的影响及作为检测微小残留病变指标的初步评价。 6、试构建检测MDR1和WT1的多重荧光定量PCR体系。 方法 1.建立荧光定量PCR检测MDR1和WT1 mRNA的方法,用重组质粒绘制MDR1和WT1标准曲线,并进行特异性、敏感性和重复性试验。 2.培养K562及HL60细胞作为阳性对照细胞系。 3.研究对象:患者样本(骨髓)取自经细胞形态学、组织化学染色及流式细胞术免疫学分型确诊的65例初治白血病患者,5名血小板减少患者标本为试验对照组。 4.提取65例白血病和5名血小板减少患者骨髓总RNA,应用建立的实时
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