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目的:通过实验数据分析乌头注射液对兔膝骨性关节炎软骨细胞中JNK表达的影响,证明乌头注射液对膝关节骨性关节炎存在良好的治疗作用。方法:1、将32只新西兰大耳兔随机分为两组:空白组和造模组,空白组(A)7只,造模组25只。对造模组进行造模:用戊巴比妥钠(30mg/kg)进行麻醉后,将预先配置好的2%w/v木瓜蛋白酶和0.03mol/L L-半胱氨酸混合溶液注入兔膝关节腔内,给药时间为第1,3,5天,给药剂量以0.1ml/kg为标准,给药完毕后在相同环境中饲养2周。从空白组和造模组中各随机挑选一只大耳兔进行解剖,以确定造模成功。再将造模组24只大耳兔随机分为模型组(B)、玻璃酸钠对照组(C)、正清风痛宁对照组(D)和乌头注射液治疗组(E),每组6只。2、造模成功后的第1、4、7、10天分别向兔双后膝关节腔注射实验试剂,玻璃酸钠组给予玻璃酸钠注射液0.2ml,正清风痛宁组给予正清风痛宁注射液0.2ml,乌头注射液组给予乌头注射液0.2ml,模型组给予生理盐水0.2ml,空白组不给予任何处理。给药完毕后继续饲养1周,以空气栓塞法逐一处死实验白兔,充分暴露各组兔右后膝关节的关节软骨,肉眼观察软骨情况,并记录;最后采集关节软骨:取膝关节胫骨平台软骨及软骨下组织置于液氮中保存。3、肉眼观察各组关节软骨外观,镜下组织病理学对比关节软骨细胞的变化,以免疫组化法检测软骨细胞中JNK的表达,实验数据采用SPSS19.0进行处理,计量资料以(x±s)表示,多组间的比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA),P<0.05表示有统计学意义。结果:1、肉眼观可见,模型组较空白组关节软骨破坏明显,乌头注射液组、玻璃酸钠组和正清风痛宁组与模型组比较,关节软骨表面无明显缺损及裂纹,软骨边缘赘生骨赘少,关节软骨较完整,且乌头注射液组明显优于对照组。2、HE染色法显示,模型组关节软骨细胞较空白组凋亡明显,乌头注射液组、玻璃酸钠组和正清风痛宁组与模型组相比,软骨细胞大致正常,偶见有白泡样的凋亡细胞,细胞的集簇,层叠现象很少,核分叶与核固缩现象亦不明显,且乌头注射液组优于对照组。3、免疫组化结果显示,模型组软骨细胞JNK表达量明显高于空白组,组间差异有统计学意义(P<0.05),乌头注射液组、玻璃酸钠组和正清风痛宁组软骨细胞JNK表达量明显低于模型组,组间差异有统计学意义(P<0.05),乌头注射液组与对照组JNK表达量差异不明显,无统计学意义(P>0.05)。结论:乌头注射液抑制了关节软骨细胞JNK的表达,保护了关节软骨,对KOA有显著的治疗作用,该机制的发生可能与MAPK/JNK信号通路被阻断有关。