人乳铁蛋白（HLF）是人类母乳中的一种重要蛋白质，是婴儿身体防御体系的重要组成成分。因为其来源特殊且含量少，所以人们就分析和克隆人乳铁蛋白的cDNA序列，在其他生物器官内表达产生转基因人乳铁蛋白。为了评价转基因效果，就需要对人乳铁蛋白进行高灵敏检测。对蛋白质的检测的需求促使人们不断的开发操作简单，灵敏度高，选择性好的蛋白质的检测新方法。表面增强拉曼散射（SERS）作为一种光谱检测分析技术，具有高灵敏度、高分辨率、抗水干扰、无损样品检测等优点，在蛋白质等生物大分子的研究中具有独特的优势。基于此，本论文分别采用金纳米粒子和薄壳硅包银纳米粒子为拉曼增强基底，建立了三种基于表面增强拉曼散射的人乳铁蛋白的检测新方法。本论文的主要内容及研究结果如下：　　1．合成了薄壳层 Ag@SiO2核壳型纳米粒子，并将其自组装于玻璃表面构成拉曼固相基底。在该基底表面修饰抗体后能特异性结合人乳铁蛋白，其表面蛋白质的组成会发生改变并引起 SERS光谱发生变化，结合主成分分析等统计分析方法，分析固相基底结合人乳铁蛋白前后拉曼光谱数据的变化，实现了对人乳铁蛋白的定性检测分析。结果表明，该方法对人乳铁蛋白的检出限为0.5μg/mL，具有比较高的特异性。该方法也为其他的蛋白质等生物大分子物质的非标记检测提供了理论依据。　　2．合成了准球形金纳米粒子并制备了4-MBA标记的免疫胶体金，利用蛋白质诱导标记免疫胶体金聚集导致标记分子 SERS信号增强的原理，实现了对人乳铁蛋白的液相高灵敏检测，检出限达到1.0×10-9 g/mL。该方法简便易行，体现了表面增强拉曼散射技术在标记分子信号灵敏放大检测中的巨大的应用前景，同时该方法也为建立简单灵敏快速的蛋白质等大分子物质的液相检测提供了一种新的可能性。　　3．以96孔ELISA板为固相载体固定人乳铁蛋白抗体，利用4-MBA标记的免疫胶体金，构建了“固相抗体-待测抗原-标记抗体”的“三明治”免疫夹心结构，并利用标记分子4-MBA的SERS信号，实现对人乳铁蛋白的高灵敏度检测分析，检测限达到1.0×10-11 g/mL。该方法体现了SERS光谱在标记免疫检测蛋白质含量中的巨大应用价值，并对人乳铁蛋白的高灵敏度检测提供了一种新的途径和方法。