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1.目的 通过观察绝经后骨质疏松症患者和去卵巢大鼠相关骨代谢差异蛋白表达情况，及电针不同经脉上相同神经节段支配的穴位组（足太阳膀胱经:脾俞、肾俞;督脉:脊中、命门）对去卵巢大鼠差异蛋白和相关信号通路的影响，筛选出可评价绝经后骨质疏松症严重程度的骨代谢指标，并进一步阐释电针治疗绝经后骨质疏松症的作用机制，为针灸防治绝经后骨质疏松症提供实验依据。 2.方法 2.1采用悬液芯片技术分析不同骨量绝经后妇女ACTH、DKK-1、FGF-23、IL-1β、IL-6、Insulin、Leptin、OPG、BGP、Osteopontin、PTH、SOST、TNF-a、MIP-1 a、FGF-2、IL-10、MCP-1、IFN-r、RANKL、TGFβ蛋白的差别;ELISA测定不同骨量绝经后妇女血清中BALP和TRACP5b的含量。 2.240只6月龄SPF级SD雌性大鼠，适应性喂养1周后，随机分为假手术组(10只)和造模组（30只）。造模组大鼠行双侧卵巢切除术，假手术组只打开腹腔找到卵巢但不切除。分别于术后3个月，4个月和5个月，采用双能X线骨密度仪测定全身骨密度;放射免疫分析方法测定血清中E2水平;ELISA法测定不同程度骨质疏松大鼠血清中BALP和TRACP5b含量;悬液芯片技术分析不同程度骨质疏松大鼠ACTH、DKK-1、FGF-23、IL-1β、IL-6、Insulin、Leptin、OPG、BGP、Osteopontin、PTH、SOST、TNF-a、MIP-1 a、FGF-2、IL-10、MCP-1、IFN-γ、RANKL、TGFβ蛋白的差别。 2.340只6月龄SPF级SD雌性大鼠，适应性喂养1周后，随机分成假手术组（10只）和模型组(30只)。造模组大鼠术后3个月，抽签法随机分为3组:即模型组（10只）、治疗组1（电针督脉组，10只）和治疗组2（电针膀胱经组，10只)。干预结束后，处死实验动物，进行指标检测。采用双能X线骨密度仪测定全身骨密度;三点弯曲法测定左侧股骨生物力学;HE染色观察右侧股骨形态学变化;ELISA法测定血清中E2、BGP、BALP和TRACP5b含量;RT-PCR法检测腰椎中Wnt1、LRP5、β-catenin、Cyclin D1、DKK-1、OPG、RANKL和RANK mRNA表达;Western Blot法检测腰椎中Wnt1、LRP5、β-catenin、Cyclin D1、DKK-1、OPG、RANKL和RANK蛋白表达。 3.结果 3.1 PMOP患者骨代谢标志物BALP、TRACP5b、DKK-1、RANKL、IL-6、OPN、BGP水平与骨密度呈负相关，OPG、Leptin、FGF-23、Insulin水平与骨密度呈正相关，且相关性有统计学意义(P＜0.05)。 3.2 PMOP大鼠中BALP、TRACP5b、DKK-1、RANKL、BGP、TNF-a水平与骨密度成负相关，OPG水平与骨密度成正相关，且相关性有统计学意义(P＜0.05)。 3.3与假手术组相比，模型组大鼠骨密度、最大载荷和断裂载荷均明显降低;经过电针督脉穴或膀胱经穴后，骨密度、最大载荷和断裂载荷均明显增加，与模型组相比，具有显著性差异(P＜0.01），但电针督脉组与电针膀胱经组间无显著性差异(P＞0.05)。 3.4假手术组中骨小梁丰富，结构完整，骨小梁数目多，骨小梁宽度较宽，连接紧密，未见骨小梁断裂;而在模型组骨小梁开始出现稀疏，骨小梁之间出现断裂，骨小梁宽度变窄;经过电针督脉或电针膀胱经治疗后，均可见较完整的骨小梁结构，骨小梁排列有序，宽度增加，无明显骨小梁断裂;电针督脉治疗组和电针膀胱经治疗组两组间无明显差别。与假手术组相比，模型组Tb.Ar、Tb.N和Tb.Th均降低，Tb.Sp升高，差异具有统计学意义(P＜0.01）;与模型组相比，电针督脉治疗组和电针膀胱经治疗组Tb.Ar、Tb.N和Tb.Th均升高，Tb.Sp降低，差异具有统计学意义(P＜0.01），但是两组治疗组间Tb.Ar、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp均无显著性差异(P＞0.05)。 3.5模型组E2含量明显低于假手术组，统计学分析具有显著性差异(P＜0.01);经过电针督脉穴或电针膀胱经穴治疗后，E2含量明显增加，与模型组相比，具有显著性差异(P＜0.01)，但电针督脉组与电针膀胱经组间无显著性差异(P＞0.05);假手术组中BGP和BALP含量高于模型组，具有显著性差异(P＜0.01）;经过电针督脉穴或电针膀胱经穴治疗后，BGP和BALP含量进一步增加，与模型组相比，具有显著性差异（P＜0.01），但电针督脉组与电针膀胱经组间无显著性差异(P＞0.05);与模型组相比，TRACP5b含量高于假手术组，统计学分析具有显著性差异;经过电针督脉穴和电针膀胱经穴治疗后，TRACP5b含量明显降低，与模型组相比，具有显著性差异(P＜0.01)，但电针督脉组与电针膀胱经组间无显著性差异(P＞0.05)。 3.6电针对Wnt1、LRP5、β-catenin、Cyclin D1、DKK-1、OPG、RANKL和RANK mRNA的影响与其对Wnt1、LRP5、β-catenin、Cyclin D1、DKK-1、OPG、RANKL和RANK蛋白的影响具有相同趋势。与假手术组相比，模型组中Wnt1、LRP5、β-catenin、Cyclin D1、OPG、RANK含量明显降低，具有显著性差异(P＜0.01);经过电针督脉穴或电针膀胱经穴治疗后，Wnt1、LRP5、β-catenin、Cyclin D1、OPG、RANK含量明显增加，与模型组相比，具有显著性差异(P＜0.01)，但电针督脉组与电针膀胱经组间无显著性差异(P＞0.05);与假手术组相比，模型组中DKK-1和RANKL含量明显升高，统计学分析具有显著性差异(P＜0.01）;经过电针督脉穴和电针膀胱经穴治疗后，DKK-1和RANKL表达量降低，与模型组相比，具有显著性差异(P＜0.01)，但电针督脉组与电针膀胱经组间无显著性差异(P＞0.05)。 4.结论 4.1人血中BALP、TRACP5b、BGP、DKK-1、RANKL、OPG、IL-6、Leptin、OPN、FGF-23、Insulin可作为评价绝经后女性骨质疏松严重程度的检测指标;大鼠血中BALP、TRACP5b、BGP、DKK-1、RANKL、TNF-a、OPG可作为评价去势大鼠骨质疏松严重程度的检测指标。其中，BALP、BGP、TRACP5b、DKK-1、OPG、RANKL可作为评价二者共同骨代谢差异的检测指标。 4.2电针督脉穴或膀胱经穴均可通过调控Wnt/β-catenin信号通路，促进Wnt1、LRP5、β-catenin、Cyclin D1表达，抑制DKK-1表达，促进成骨细胞增殖与分化，增加骨形成;通过调控OPG/RANKL/RANK信号通路，上调OPG、RANK表达，下调RANKL表达，抑制破骨细胞的分化，降低骨吸收水平，从而防治骨质疏松症。