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果蝇(Drosophila melanogaster)减数分裂阻滞基因Dmaly,是减数分裂G2-M周期和精子形成所必需的。为了探讨家蚕(Bombyx mori)Bmaly在生殖细胞发育过程中的功能,利用GenBank中已公开的Dmaly序列进行Blast搜寻,电子克隆了Bmaly基因的cDNA序列,在此基础上通过RT-PCR克隆了Bmaly的cDNA序列。测序结果显示,Bmaly CDNA序列与预测结果一致,ORF全长1713bp,编码570aa；结构预测结果显示BmAly与它们Aly同系物一样具有DIRP(Domain in Rb—relatedPathway)结构域。进化分析结果显示昆虫的Aly聚为一类,但不同昆虫之间的Aly并没有按昆虫所在的目聚类,推测不同昆虫的aly有各自特殊的进化方式；将Bmaly基因克隆进pGS21a(+)载体进行原核表达,重组蛋白免疫小鼠,获得了鼠抗BmAly多抗。免疫荧光实验结果显示,BmAly在细胞质和细胞核中均有分布；qRT-PCR结果显示,Bmaly在精巢中的表达水平比卵巢高,在其它组织中几乎不表达。为了进一步探讨Bmaly基因的功能,3、4龄起蚕注射Bmaly siRNA后,调查精细胞的发育以及对蚕卵受精率的影响。结果显示注射aly657 siRNA后,精细胞发育明显延缓,5龄第1天精细胞的发育大多处于初级精母细胞开始进行第1次减数分裂期,而正常对照精细胞的发育基本已进入第1次减数分裂中后期；注射aly657 siRNA区蚕卵的不受精卵率为22.20％,而正常对照区蚕卵的受精率为1.76％,表明Bmaly基因为减数分裂阻滞基因,抑制该基因的表达可阻滞精细胞的发育。
RNA和输出因子结合蛋白(RNA and export factor binding proteins,REF)参与RNA的稳定、加工和输出。本研究参照已公开的家蚕序列(DQ497195.1),通过RT-PCR克隆了家蚕ref cDNA基因(Bmref),测序结果显示该基因的开放读码框为765 bp,编码254 aa,BmREF与果蝇、小鼠(Mus musculus)的同源体的氨基酸序列的一致性分别为49.7％和52.7％。结构预测结果显示BmREF具有REF家族的与RNA结合的结构域RRM,N、C端分别且有REF—N和REF-C基序。进化分析结果显示昆虫的REF聚为一类,BmREF与赤拟谷盗(Tribolium castaneum)、意大利蜜蜂(Apis mellifera)的REF较为接近。将Bmref基因克隆进pGS21a(+)载体进行原核表达,重组蛋白免疫小鼠,获得鼠抗BmREF多抗。免疫荧光实验结果显示,BmREF在细胞质和细胞核中均有分布,但主要分布在细胞核中。芯片数据分析显示Bmref基因在家蚕幼虫5龄第3天各组织均有较高水平的表达。研究结果显示BmREF可能在RNA的核输出方面发挥作用,为进一步探讨BmREF的功能奠定了基础。