绵羊高繁殖力候选基因INHBA和INHBB基因的研究

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抑制素(inhibin,INH)是一种由性腺分泌的二聚体糖蛋白,由α亚基和两种β亚基(β_A、β_B)中的一个以二硫键相连形成的二聚体,它能有效抑制垂体促卵泡素的合成与分泌。本研究分析了抑制素基因β_A基因(INHBA)与抑制素基因β_B基因(INHBB)的多态性,探索这两个基因与小尾寒羊高繁殖力之间的关系,为我国开展小尾寒羊高繁殖力的遗传学基础研究提供科学依据。 本研究根据牛抑制素β_A亚基(inhibin β_A,INHBA)基因外显子1和外显子2序列设计7对引物,采用PCR-SSCP技术检测INHBA基因在高繁殖力绵羊品种(小尾寒羊、湖羊)以及低繁殖力绵羊品种(多赛特羊、特克塞尔羊、德国肉用美利奴羊)中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对小尾寒羊高繁殖力的影响。结果发现INHBA1-2、INHBA2-2与INHBA2-4扩增片段有多态性,INHBA1-3、INHBA2-3扩增片段均不存在多态性,INHBA1-1、INHBA2-1两对引物扩增效果不好。对于引物INHBA1-2,经χ~2适合性检验,在小尾寒羊、特克塞尔羊中保持了Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),在湖羊中已经显著偏离Hardy-Weinberg平衡(P<0.05),德国肉用美利奴羊极显著地偏离了Hardy-Weinberg平衡(P<0.01),多赛特羊没有多态,BB型和AA型相比在该片段发生1处碱基突变(C→A),该突变没有导致氨基酸的改变,BB型小尾寒羊平均产羔数比AA型小尾寒羊多0.26只。 对于引物INHBA2-2,经χ~2适合性检验,在德国肉用美利奴羊群体中的分布都极显著地偏离了Hardy-Weinberg平衡(P<0.01),在多赛特羊中都保持了Hardy-Weinberg平衡(P>0.05):小尾寒羊、湖羊、特克塞尔羊中没有多态。HH型和GG型相比在该片段第142位发生1处碱基突变(C→T),该突变导致了氨基酸由丝氨酸改变为亮氨酸,高繁殖力的小尾寒羊、湖羊和低繁殖力的特克塞尔羊只出现GG基因型,而低繁殖力的多赛特羊、德国肉用美利奴羊则出现GG、GH、HH3种基因型。 对于引物INHBA2-4,经χ~2适合性检验,在小尾寒羊、湖羊、特克塞尔羊中都保持了Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),而在多赛特羊和德国肉用美利奴羊群体中极显著偏离了Hardy-Weinberg平衡(P<0.01)。LL型和KK型相比在该片段第95位发生1处碱基突变(G→A),该突变没有导致氨基酸的改变,LL型小尾寒羊平均产羔数比KK型小尾寒羊多0.28只。 本研究根据牛抑制素β_B(inhibin β_B,INHBB)基因外显子1和外显子2序列设计6对引物,采用PCR-SSCP技术检测INHBB基因外显子1和外显子2在5个绵羊品种中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对小尾寒羊和湖羊高繁殖力的影响。结果表明:只有外显子2的第3对引物NHBB2-3扩增片段具有多态性,INHBB2-2扩增片段都没有多态性,其余有4对引物扩增效果不好。对于引物INHBB2-3,只在高繁殖力的湖羊中发现3种基因型(AA、AB、BB),而其余4种绵羊都只有AA基因型;统计结果表明:湖羊AA、AB、BB基因型频率分别为0.636、0.046、0.318:经经χ~2适合性检验,适合性检验,在湖羊中保持了Hardy-Weinberg平衡(P>0.05):测序结果
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