猪苓Polyporus umbellatus(Pers.)Fries为多孔菌科真菌,在我国分布广泛,多生长在海拔800~2000 m的林地,因其药效明确、用途不断扩大,猪苓需求量逐年增加,由于无节制的采挖导致猪苓野生资源锐减,1987年猪苓被列入我国《三级保护野生中药材》名录中。现市售猪苓多来源于栽培,主产于四川、陕西、云南、山西等地。猪苓虽已实现人工栽培,但因其生长环境特殊,栽培技术不完善,致使其产量和质量不稳定,故需优化升级猪苓栽培技术,以保障猪苓生产持续、稳定,药材安全、有效。1猪苓栽培关键技术研究本文以猪苓为研究对象,在四川省南江县开展栽培材料、生长环境、栽培方式与管理、适宜采收时间等猪苓栽培的关键技术研究,综合分析猪苓产量与质量,制定适宜四川猪苓生产的栽培技术。1.1栽培材料通过对猪苓苓种、蜜环菌、菌材的试验研究,结果显示:猪苓苓种以四川猪屎苓苓种为好,最佳用量为0.2 kg/窖;蜜环菌以京-234和A9用量为2.0瓶/窖时产量较好,综合质量分析,以蜜环菌A9较优;菌材选用桦树,用硝酸铵、硝酸钾、磷酸氢二钾溶液浸泡,均能达到增产的效果,尤以磷酸氢二钾浸泡菌材增产效果佳,质量较优。1.2生长环境通过对海拔、坡向和土质三个环境因子的研究,确定基地栽培猪苓时选择海拔1200~1250 m的阴坡坡向,含腐殖质的林下沙地为宜。1.3栽培方式与管理猪苓的栽培方式、窖型、施肥、除草及覆盖处理对猪苓的产量和质量均有影响,通过研究确定猪苓采用1层、新旧菌材搭配使用比例为1:2、窖深为20~30cm、菌窖表面凸起呈龟背形为好;基肥选用1.0 kg/窖的植物营养土、草炭土、草木灰或0.5 kg/窖的腐熟牛羊粪增产效果较好,追肥选用硝酸钾或硝酸铵均能达到增产的效果,尤以硝酸钾追肥的猪苓产量高、质量优;冬季(11月至次年3月)覆膜保暖,夏季进行人工除草。1.4适宜采收时间考察不同生长年限及采收期对猪苓产量和质量的影响,确定其最佳采收年限为3年,适宜采收期为5月。2猪苓药材质量评价研究对5大药材市场收集的市售猪苓药材28批、产地对口药材7批,共35批猪苓药材开展外观性状与内在质量相结合的综合评价研究。2.1不同来源猪苓药材性状评价所收集的35批猪苓样品中四川占37.14%,陕西占28.57%,其余样品分别来自云南、东北、山西、甘肃和安徽等地;其商品规格分为个子货(42.86%)和猪苓片(57.14%)。经性状分析,不同产地猪苓药材外观性状尤以断面差异较大,20.00%的个子货及40.00%的猪苓片断面呈腐朽状,不符合《中国药典》2015版性状项下的描述。而来源于陕西(HHC7、BZ5、SX)和山西(BZ2)的4批样品呈条形、类圆形或扁块状,大小较均匀,表面黑色、灰黑色或棕黑色,皱缩或有瘤状突起,断面类白色或黄白色,略呈颗粒状,无腐朽,无泥沙,性状优。2.2猪苓HPLC特征图谱的建立建立了有7个色谱峰的猪苓药材HPLC特征图谱,指认了其中5个色谱峰,分别为腺苷、尿嘧啶、尿苷、腺嘌呤和胞苷,并作了方法学考察,结果表明该方法稳定可靠,可用于药材质量评价。用该方法对35批猪苓药材进行评价,结果表明各产地猪苓药材HPLC特征峰的保留时间差异不显著,峰面积存在显著性差异。2.3猪苓个、猪苓皮和去皮猪苓成分比较研究历代本草中记载猪苓“用须去净黑皮”,通过对猪苓个、猪苓皮和去皮猪苓进行对比研究,结果表明:猪苓个、猪苓皮和去皮猪苓之间麦角甾醇含量无明显差异;多糖、浸出物和5个核苷(腺苷、尿嘧啶、尿苷、腺嘌呤和胞苷)总量均以猪苓个高于去皮猪苓;所有样品总灰分和酸不溶性灰分均符合《中国药典》2015年版一部规定。因此,古本草中猪苓“用须去净黑皮”有待商榷。2.4不同来源猪苓药材内在质量分析不同来源猪苓药材的内在指标存在地域性差异。麦角甾醇含量以四川样品较高;多糖含量以陕西猪苓较高;浸出物和5个核苷总量陕西、云南、山西等地的猪苓差别不大;所有样品总灰分、酸不溶性灰分均符合《中国药典》2015年版一部猪苓项下规定。2.5加权评分法评价猪苓药材质量采用加权评分法对35批猪苓的外观性状和内在指标成分进行综合评价,所有样品综合得分在62.44~92.44分,其中四川(NJ6)、陕西(HHC7、BZ5、SX)及山西(BZ2)5批药材,综合评分大于80分(占比14.29%),质量较优;70~80分有22批药材,占比62.85%;四川样品(HHC1、HHC2、NJ4)、陕西样品(AG2)、云南样品(YL3)、山西样品(BZ1)及其他产地猪苓(QP1、HHC10)8批药材得分在60~70分,占比22.86%。