多酚(Polyphenol)是自然界主要的次级代谢产物之一。多酚是植物中常见的活性物质之一,主要生理活性为抗氧化、抗肿瘤、抑菌和提高机体免疫力等等。芸豆种类繁多,结构多样,并有许多实际应用。芸豆在我省分布十分广泛,我国的东北地区是出产芸豆种类和数量最多的地区。随着杂粮主食化和杂粮生产市场化的现状,芸豆所带来的经济效益急速增长,营养价值颇受关注,因此具有广阔的前景。但豆类种子中含有的抗营养因子的毒副作用直接或间接的影响豆类产业的发展。近年来研究表明,豆类种子经萌发处理后,抗营养因子的含量显著降低甚至消失,由此看来豆类芽菜在一定程度上可以增加豆类的营养价值,使豆类产业发展前景更加广阔。本论文研究内容和结论如下:1.芸豆芽菜多酚提取工艺的研究本实验采用乙醇-溶剂提取法对芸豆芽菜多酚进行提取。采用Folin法测定芸豆芽菜粗提液中的多酚含量。实验以没食子酸曲线为标准,以计算芸豆芽菜多酚的提取率。通过单因素实验和正交实验优化芸豆芽菜多酚的最佳提取工艺条件。实验结果表明,芸豆芽菜多酚的最佳提取工艺为:料液比为1:20,水浴温度为50℃,乙醇浓度为60%,提取时间为2.0 h。在这个条件下进行验证性实验,芸豆芽菜多酚的提取率可达到2.76%。2.大孔吸附树脂分离纯化芸豆芽菜多酚的研究本章实验采用大孔吸附树脂法来探究分离纯化芸豆芽菜多酚的最佳工艺条件。首先进行静态吸附、解吸实验,并绘制吸附动力学曲线来评定大孔树脂的吸附效果。结果显示,AB-8型大孔树脂纯化芸豆芽菜多酚的能力较强,可作为后续动态实验选用的大孔树脂。后续实验结果表明,纯化芸豆芽菜多酚的最佳工艺条件为:上样浓度为1.0 mg/mL,洗脱液为体积分数为70%的乙醇溶液,洗脱流速为1.0 mL/min。在此条件下得到的芸豆芽菜多酚纯化物的纯度由10.37%提高到32.29%。3.芸豆芽菜多酚体外抗氧化活性研究本章实验以抗坏血酸(Vc)作为对照测定了芸豆芽菜多酚对DPPH、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除能力。根据线性方程计算,在清除DPPH自由基实验中,芸豆芽菜多酚粗提物、纯化物及Vc的IC50值分别为0.409 mg/mL、0.285 mg/mL、0.086 mg/mL;在清除超氧阴离子自由基实验中,芸豆芽菜多酚粗提物、纯化物及Vc的IC50值分别是0.264mg/mL、0.183 mg/mL和0.091 mg/mL;在清除羟基自由基的实验中,芸豆芽菜多酚粗提物、纯化物和Vc的IC50值分别为0.263 mg/mL、0.223 mg/mL和0.079 mg/mL。三种评价实验均显示,随着芸豆芽菜多酚含量的升高,其对自由基的清除能力逐渐增强,但抗氧化活性全部都弱于Vc。4.芸豆芽菜多酚对小鼠过氧化损伤及肝肾功能修复作用研究本实验探究了芸豆芽菜多酚对过氧化损伤小鼠模型的修复作用和肝肾功能保护作用。向实验小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖以构建过氧化损伤模型。以抗坏血酸(Vc)为对照,连续灌胃芸豆芽菜多酚28 d后,记录小鼠体重变化和脏器系数变化,同时测定小鼠超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)水平及肝肾功能水平,并观察小鼠肝肾组织病变切片。实验结果表明,小鼠的体重、脏器系数均无明显变化,说明芸豆芽菜多酚对小鼠的免疫器官具有一定的保护和修复作用。同时芸豆芽菜多酚能够促进过氧化损伤小鼠血清中的SOD、GSH-Px和MDA的指标接近正常值(P<0.05),且呈现一定的量效关系。在修复肝肾组织损伤的实验中,D-半乳糖的摄入使小鼠的肝肾组织明显损伤,引发机体炎症,模型小鼠肝肾功能均异常,但体重和脏器系数无明显变化。同时芸豆芽菜多酚能够促进过氧化损伤模型小鼠血清中的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)和肌酐(CR)的指标趋于正常(P<0.05)。说明芸豆芽菜多酚能够修复肝肾组织损伤,能够恢复机体健康。