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通过对HL29菌株的部分生理生化性状和16SrRNA的基因序列测定和分析,初步鉴定HL29为芽孢杆菌属枯草芽孢杆菌.系统研究了HL29在不同液体培养基中的生长曲线、OD450值和pH值的变化,表明YMA和LB两种培养基适宜于液体培养,摇培24h后菌量达到高峰.应用重组质粒Pgfp22转化枯草芽孢杆菌HL29的感受态细胞,成功地获得了绿色荧光蛋白基因GPF标记的枯草芽孢杆菌HL29,并对其质粒遗传稳定性进行了研究.结果表明,标记菌株gfp-HL29具有良好的质粒遗传稳定性,经多次继代培养,在发光表型、对Cm抗性和产素方面性状稳定,在生长速度和定殖方面与出发菌株HL29无明显差异.借助共聚焦荧光扫描电镜和透射电镜探明了温室无菌条件和田间小规模可控微区试验中生防菌HL29在紫花苜蓿根际的定殖动态、分布情况及其对根际微生物区系的影响.结果显示gfp-HL29能够定殖于紫花苜蓿植株的不同部位,定殖60d后植株体内菌的存活量达到10<4>cfu/g以上;120d后植株根、茎和叶器官内的检出量为10<3>cfu/g以上,尤以根表的检出菌量最高.荧光扫描电镜观察发现,gfp-HL29主要定殖、分布在植株细胞间隙,其定殖部位呈现明亮的绿色荧光.采用平板培养法检测了HL29菌株及代谢产物对包括三个真菌亚门12个属的19种植物病原真菌:棉花黄萎病菌,棉花枯萎病菌,苹果轮纹病菌,苹果腐烂病菌,番茄叶霉病菌,番茄灰霉病菌,番茄早疫病菌,小麦赤霉病菌,西瓜枯萎病菌,串珠镰刀菌,黄瓜枯萎病菌,豌豆茄病镰刀菌,稻瘟菌,玉米小斑病菌,玉米弯孢病菌,瓜果腐霉菌,小麦纹枯病菌,胶孢镰刀菌和苜蓿根腐病镰刀菌及5个重要属的代表性病原细菌:土壤杆菌K27,番茄溃疡病菌,番茄疮痂病菌,黄瓜角斑病菌,水稻白叶枯病菌,棉花角斑病菌,马铃薯软腐病菌和茄青枯病菌的抑菌作用,结果显示HL29菌株及代谢产物对生物测定模型中除假单胞菌属之外的其它供试靶标病菌均具有明显的抑制生长作用,表明HL29具有广泛的抑菌谱.进行了HL29的最适产素培养基和培养条件筛选.试验表明,适合于HL29产素的培养基为YMA和玉米浆培养基.HL29在设计的摇培条件(28~32℃,起始pH为6.0,装液量为60﹪,接种量为1﹪)下培养24h,其代谢产物的抑菌作用最为显著.其中分子量小于1000Da的代谢产物抑菌活性明显高于其它分子量过滤液.HL29的代谢液中抗菌物质粗提物在25~80℃下处理30min,抗菌活性可保持在80﹪以上;在pH为4~8的介质中处理12h后抑菌活性可保持在90﹪以上.蛋白酶K、胃蛋白酶和胰蛋白酶处理代谢液中抗菌物质粗提物4h后与空白对照相比无差异.借助TLC、柱层析、HPLC、HPLC-MS、IR和NMR和双层扩散法等分离、分析和活性测定技术,对HL29的抗菌物质进行了提取、分离和部分纯化研究.结果显示HL29抗菌物质按照极性梯度洗脱后呈现出3个活性峰,表明HL29抗菌物质至少有三种化合物组成,三部分流分在220~290nm均有强烈吸收,最大吸收波长为230nm.测定部分纯化的活性物质分子量,表明其均为小分子化合物.其中Anti-C6是抗菌物质Anti-S6通过重结晶方法获得的白色针状结晶,波谱解析表明为含氮杂环类化合物.采用生物化学,分子生物学和光镜、电镜等、同位素标记等方法研究了Anti-S6的抑菌作用机制.