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目的：在我国,膀胱癌发病率居泌尿系统肿瘤首位,具有易复发、易侵袭、易产生获得性耐药等特点,其治疗效果并不理想。新的膀胱癌药物的研发成为膀胱癌治疗领域更待解决的问题。我们的前期研究发现,膀胱癌干(起始)细胞就存在于EMA-CD44v6+亚群,且这群以CD44v6蛋白为标记物的癌细胞很可能是膀胱癌复发和转移的主要原因。人类多种恶性肿瘤组织中普遍存在CD44v6表达失控,其高表达被认为与肿瘤的发生、发展及转移有关。鉴于此,本课题检测了细胞黏附分子CD44v6和上皮膜抗原EMA在膀胱尿路上皮细胞两类癌中的表达情况,利用特异性封闭型抗CD44v6单克隆抗体封闭,探讨其对膀胱癌T24细胞生物学行为的影响,并对可能的分子机制进行初步探讨。方法：1、本研究收集40例外科手术切除膀胱癌标本和5例正常膀胱组织,应用免疫组织化学(PowerVision两步法)检测不同病理分期及组织分级的BTCC标本和正常膀胱粘膜中,EMA和CD44v6蛋白的表达,系统分析它们与临床病理参数之间的关系,研究二者在膀胱癌不同病理分期及组织分级的表达情况。2、体外培养膀胱癌细胞T24和正常膀胱粘膜上皮,采用免疫细胞化学法检测膀胱癌细胞T24和正常膀胱尿路上皮细胞中,CD44v6蛋白的表达情况。3、通过抗体封闭的手段,用不同浓度的anti-CD44v6单抗分别与人膀胱癌细胞T24共同培‘养24h、48h、72h后,MTT法观察细胞生长情况,流式细胞仪FCM检测细胞凋亡情况。免疫细胞化学法检测凋亡相关蛋白Bax和bcl-2的胞内表达情况。4、Transwell侵袭迁移实验观察anti-CD44v6单抗作用后,膀胱癌细胞T24侵袭迁移能力的变化。结果：1、EMA和CD44v6在膀胱癌中的阳性表达率分别为92.5%和57.5%。EMA的表达率与膀胱肿瘤组织学分级和分期无关(P>0.05)。随着膀胱癌进展,CD44v6表达显著下降,与病理分级及分期有关(P<0.01)。正常和癌性尿路上皮中EMA-细胞位于可能的干细胞位置(基底细胞层),EMA+细胞总是位于相对成熟的位置(靠近上皮腔面)。正常和癌性尿路上皮中CD44v6+细胞位于可能的干细胞位置(基底细胞层),CD44v6-细胞总是位于相对成熟的位置(靠近表层)。2、膀胱癌细胞株T24中,CD44v6蛋白均一表达,主要表达在细胞膜,呈均匀棕黄色染色,细胞浆内有染色少许或无色,而正常膀胱尿路上皮细胞几乎不表达CD44v6蛋白。3、MTT法检测结果显示,通过anti-CD44v6单抗封闭,可抑制T24细胞的生长(P<0.05),诱导T24细胞凋亡(P<0.01),并且bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达增加(P<0.01)。光镜下可见经抗体封闭的细胞形态学的改变。4、与anti-CD44v6单抗封闭前相比,经anti-CD44v6单抗封闭处理之后,可见穿膜细胞数目明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：1、依据免疫组化结果,表明CD44v6+和EMA-可能是膀胱癌干(起始)细胞表面标志。2、膀胱癌细胞T24经anti-CD44v6单抗封闭后,细胞的增殖受到抑制,呈时间剂量依赖关系。经anti-CD44v6单抗封闭后,凋亡率增加,推测其机制可能与凋亡调控基因bcl-2和Bax表达水平变化有关。3、CD44v6蛋白与肿瘤细胞的侵袭迁移运动密切相关, anti-CD44v6单抗封闭可以抑制T24细胞侵袭迁移能力。