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以南方根结线虫为靶标,从青海土壤样品中筛选具有杀线虫活性的生防真菌;通过传统分类和分子系统学等方法对所筛选的真菌菌株进行分类鉴定;利用萃取、层析等方法,分离纯化真菌菌株产生的杀南方根结线虫代谢活性物质,并结合质谱和核磁分析进行结构解析。在此基础上,测定了活性物质的室内毒力(LC50)和盆栽防治效果。结果如下:1、通过初筛和复筛,获得了2株对南方根结线虫致死率高于90%,且活性稳定的真菌菌株,分别记作MHZ111和D35。在形态学分类的基础上,通过ITS序列比对分析,分别将菌株MHZ111和D35鉴定为产紫青霉菌和菌核青霉菌。2、菌株MHZ111和D35代谢活性物质的分离、纯化过程包括(1)萃取:发酵液用乙酸乙酯萃取,萃取液用旋转蒸发仪浓缩。(2)柱层析:将萃取后的浓缩液与200300目硅胶按质量比1:5混匀,干燥后研磨混匀后装柱,分别用4倍硅胶柱体积的石油醚、石油醚/丙酮(体积比分别为20:1、10:1、5:1和1:1)、丙酮、二氯甲烷/甲醇(体积比分别为20:1、10:1、5:1和1:1)以及分析纯甲醇为洗脱剂,减压条件下,进行梯度洗脱。以250 mL为单位依次收集洗脱液,将收集的洗脱液用旋转蒸发仪浓缩。(3)TLC层析:以石油醚:丙酮(体积比为1:1)为展层剂对各组浓缩液进行硅胶薄层层析,合并具有杀线虫活性且Rf值相同的组分。(4)制备液相色谱循环制备:将具有杀线虫活性且Rf值相同的组分,用制备型液相色谱仪进行循环制备,获得活性物质单体化合物。3、从菌株MHZ111和D35中获得6种单体活性化合物,并对这6种单体化合物进行了质谱和核磁分析。结果表明,从MHZ111代谢活性物质中获得4种单体化合物的分子式分别为C25H28O7、C26H32O8、C25H30O6和C18H16O6,分别属于杂萜类化合物、22-epoxyberkeleydione、Chrodrimanin E和Vermistatin;从D35代谢活性物质中获得2种单体化合物,分子式分别为C12H12O4和C20H24O9,分别属于邻苯二甲酸双庚酯和2-甲基-5,7-二甲氧基色酮。4、室内毒力测定结果表明,两株真菌代谢活性物质均具有较强的杀南方根结线虫活性。其中,菌株MHZ111产生的杂萜类化合物、22-epoxyberkeleydione、Chrodrimanin E和Vermistatin的LC50分别为109.5 mg/L、95.4 mg/L、117.1 mg/L和88.7 mg/L;菌株D35产生的邻苯二甲酸双庚酯和2-甲基-5,7-二甲氧基色酮的LC50分别177.2 mg/L和179.2 mg/L。5、盆栽试验结果表明,菌株MHZ111和D35发酵液处理后,黄瓜根结线虫病发病明显比对照轻。其中,菌株MHZ111发酵液处理后,黄瓜南方根结线虫的病情指数为25.4,防治效果为73.8%;菌株D35发酵液处理后,黄瓜南方根结线虫的病情指数22.2,防治效果为77.1%。