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目的： 探讨去泛素化酶OTUD5对PIF1蛋白的调控机制。已知OTUD5与PIF1存在有相互作用关系，OTUD5是否对PIF1发挥重要的作用尚不清楚，所以本课题将围绕OTUD5对PIF1的调控机制进行研究，进一步探索作为OUT家族重要成员OTUD5对PIF1的调控是否有重要的功能。 方法： 利用Western blot实验检测OTUD5过表达后内源及外源表达的PIF1蛋白的变化。采用RNA干扰技术敲低OTUD5检测外源表达的PIF1蛋白的变化。采用实时定量PCR(RT-PCR)检测OTUD5过表达或敲低对 PIF1mRNA水平的影响，探讨 OTUD5对 PIF1转录水平的调节。利用半寿期实验检测OTUD5过表达后PIF1的降解速率，探讨OTUD5对PIF1蛋白稳定性的调节。运用泛素化实验检测OTUD5过表达或敲低对PIF1蛋白的泛素化的影响，探讨OTUD5对PIF1表达的调节作用。体外泛素化实验检测OTUD5过表达对PIF1全长蛋白及PIF1C截短体的去泛素化作用，判断PINT结构域在OTUD5去泛素化中的作用。 结果： ⑴过表达OTUD5增加内源PIF1及外源表达PIF1蛋白含量。⑵敲低OTUD5降低外源表达的PIF1蛋白含量。⑶过表达OTUD5增加PIF1蛋白半寿期，但过表达或敲低OTUD5对PIF1mRNA没有影响。⑷过表达OTUD5降低PIF1蛋白的泛素化水平，敲低OTUD5增加了PIF1泛素化水平。⑸PINT结构域缺失抑制了OTUD5对PIF1的去泛素化作用。 结论： OTUD5通过与PIF1蛋白PINT结构域结合去泛素化PIF1增加PIF1蛋白稳定性。