目的: 一、探讨广州地区胃、十二指肠疾病患儿H.pylorivacA、cagA、iceA优势基因亚型，并与国内外H.pylori感染患者的优势基因亚型相比较。 二、探讨广州地区感染H.pylori患儿与未感染H.pylori患儿的胃、十二指肠疾病类型和胃粘膜病变程度的差异。 三、探讨广州地区儿童感染的H.pylorivacA、cagA、iceA基因亚型与H.pylori胃粘膜定植密度的关系。 四、探讨广州地区儿童感染的H.pylori胃粘膜定植密度与胃、十二指肠疾病类型和胃粘膜病变程度的关系。 材料和方法: 一、材料(一)研究对象 消化道症状(如上腹部不适、腹痛、恶心、呕吐、反酸、嗳气等)需胃镜检查的患儿，胃镜检查前1个月内没有服用过抗生素、质子泵抑制剂、H2受体拮抗剂、非甾体类消炎药等。本研究共检查患儿105例，其中女55例，男50例，女：男=1.1：1.0；年龄范围3～13岁，平均年龄7.7岁，其中0～5岁组24例，6～9岁组52例，10～14岁组29例。 (二)取材 胃窦处距幽门口5厘米内取粘膜3块，1块用于快速尿素酶反应，1块送病理检查，1块用聚合酶链反应(PCR)检测vacA、cagA和iceA基因。 二、方法 (一)抽提胃粘膜H.pylori基因组，参考文献[3,38-42]设计引物，引物由上海博雅公司和塞百胜公司合成。 (二)聚合酶链反应(PCR)检测目的基因，并将PCR产物纯化、连接和转化。 (三)测序 M13-47测序引物进行PCR产物测序(上海博雅公司)，测序结果与Pubmed上公布的H.pylori26695序列进行对比分析。 (四)统计学处理 用SPSS12.0forwindows软件处理数据，两个或两个以上样本率的比较采用x2检验，校正的x2检验，确切概率法，不符合参数检验条件的资料采用秩和检验(Mann-WhitneyUtest和Kruskall-WallisHtest)，双变量等级数据采用Spearman等级相关分析，P＜0.05则认为差异有显著性。 结果 一、H.pylori检出结果 (一)PCR检测H.pylorivacA、cagA和iceA基因，PCR产物连接转化后送测序，测序结果与Pubmed上公布的H.pylori26695序列进行对比分析，同源性91％以上。 (见附图测序报告) (二)105例患儿快速尿素酶反应均阳性，病理检查H.pylori阳性53例，PCR检测阳性64例，其中病理结果阳性而PCR结果阴性1例，PCR结果阳性而病理阴性12例，三项检查均阳性52例，其中女26例，占24.76％(26/105)，男26例，占24.76％(26/105)，0～5岁组13例，6～9岁组27例，10～14岁组12例。 二、感染H.pylori患儿与未感染H.pylori患儿的胃、十二指肠疾病类型比较 53例患儿感染H.pylori，胃镜下慢性浅表性胃炎17例，慢性浅表性胃炎合并十二指肠球炎32例，慢性浅表性胃炎合并十二指肠球部溃疡4例；52例患儿未感染H.pylori，胃镜下未见病变者1例，慢性浅表性胃炎18例，慢性浅表性胃炎合并十二指肠球炎32例，慢性浅表性胃炎合并十二指肠球部溃疡1例。比较感染H.pylori患儿与未感染H.pylori患儿的胃、十二指肠疾病类型，二者差异无显著性(P＞0.05)。 三、感染H.pylori患儿与未感染H.pylori患儿的胃粘膜病变程度的比较53例患儿感染H.pylori，其中胃粘膜病理诊断为轻度慢性胃炎6例，中度慢性胃炎19例，重度慢性胃炎28例；52例患儿未感染H.pylori，其中粘膜未见病变12例，轻度慢性胃炎31例，中度慢性胃炎6例，重度慢性胃炎3例。比较感染H.pylori患儿与未感染H.pylori患儿的胃粘膜病变程度，二者差异有显著性(P＜0.05)。感染H.pylori患儿胃粘膜损伤程度较未感染H.pylori患儿严重。 四、PCR检测H.pylorivacA、cagA、iceA基因亚型 52例患儿中含有H.pylorivacAslaslc/m2、cagA+和iceA1基因组合36例，其余12种基因组合共16例，H.pylorivacAslaslc/m2、cagA+和iceA1基因组合与其它基因组合比较，差异有显著性(P＜0.01)。 五、H.pylorivacA、cagA、iceA优势基因亚型与胃、十二指肠疾病类型的关系 慢性浅表性胃炎中感染H.pylorivacAs1aslc/m2亚型菌株的患儿13例，未感染H.pylorivacAs1aslc/m2亚型菌株的患儿3例；慢性浅表性胃炎合并十二指肠球炎中感染H.pylorivacAslaslc/m2亚型菌株的患儿27例，未感染H.pylorivacAslaslc/m2亚型菌株的患儿5例；慢性浅表性胃炎合并十二指肠球部溃疡中感染H.pylorivacAslaslc/m2亚型菌株的患儿3例，未感染H.pylorivacAslaslc/m2亚型菌株的患儿1例，感染.pylorivacAslaslc//m2亚型菌株的患儿与未感染H.pylorivacAslaslc/m2亚型菌株的患儿的胃、十二指肠疾病类型的差异无显著性(P＞0.05)。 六、H.pylorivacA、cagA、iceA优势基因亚型与胃粘膜病变程度的关系感染HpylorivacAslaslc/m2亚型菌株的患儿中轻度慢性胃炎4例，中度慢性胃炎15例，重度慢性胃炎24例；未感染H.pylorivacAslaslc/m2亚型菌株的患儿中轻度慢性胃炎1例，中度慢性胃炎4例，重度慢性胃炎4例，感染H.pylorivacAslaslc/m2亚型菌株的患儿与未感染H.pylorivacAslaslc/m2亚型菌株的患儿的胃粘膜病变程度的差异无显著性(P＞0.05)。 七、H.pylorivacA、cagA、iceA优势基因亚型与H.pylori胃粘膜定植密度的关系(表1) 表1H.pylorivacA、cagA、iceA优势基因亚型与H.pylori胃粘膜定植密度的关系 定植密度slas1c/m2+slaslc/m2-cagA+cagA-iceA1+iceA1+10111282++919174+++247272283未感染H.pylori患儿共52例，其中胃镜诊断胃、十二指肠粘膜未见病变1例，慢性浅表性胃炎18例，慢性浅表性胃炎合并十二指肠球炎32例，慢性浅表性胃炎合并十二指肠球部溃疡1例；H.pylori胃粘膜定植密度“+，，患儿共14例，其中慢性浅表性胃炎6例，慢性浅表性胃炎合并十二指肠球炎7例，慢性浅表性胃炎合并十二指肠球部溃疡1例；H.pylori胃粘膜定植密度“++”患儿共10例，其中慢性浅表性胃炎2例，慢性浅表性胃炎合并十二指肠球炎8例，无慢性浅表性胃炎合并十二指肠球部溃疡病例；H.pylori胃粘膜定植密度“+++”患儿共26例，其中慢性浅表性胃炎9例，慢性浅表性胃炎合并十二指肠球炎17例，慢性浅表性胃炎合并十二指肠球部溃疡3例，H.pylori胃粘膜定植密度在三种胃、十二指肠疾病类型的分布差异无显著性(P＞0.05)。 九、H.pylori胃粘膜定植密度与胃粘膜病变程度的关系 胃粘膜病理诊断无H.pylori感染患儿共52例，其中未见病变12例，轻度慢性胃炎31例，中度慢性胃炎6例，重度慢性胃炎3例；H.pylori胃粘膜定植密度“+，，患儿共14例，其中轻度慢性胃炎6例，中度慢性胃炎7例，重度慢性胃炎1例；H.pylori胃粘膜定植密度“++”患儿共10例，其中无轻度慢性胃炎病例，中度慢性胃炎6例，重度慢性胃炎4例；H.pylori胃粘膜定植密度“+++，，患儿共29例，无轻度慢性胃炎病例，中度慢性胃炎6例，重度慢性胃炎23例，H.pylori胃粘膜定植密度在胃粘膜病变程度的分布差异无显著性(P＞0.05)。 结论 一、感染H.pylori患儿的胃粘膜损伤程度较未感染H.pylori患儿严重，H.pylori感染与三种胃、十二指肠疾病类型无关。 二、广州地区儿童感染的H.pylorivacA、cagA、iceA的优势基因亚型是vacAslaslc/m2、cagA+和iceA1；H.pylorivacAslaslc/m2、cagA+和iceA1基因组合是广州地区儿童感染的H.pylori的优势基因组合，容易导致严重胃炎。 三、H.pylori胃粘膜定植密度与三种胃、十二指肠疾病类型无相关性，H.pylori胃粘膜定植密度与胃粘膜损害程度无相关性。 四、H.pylori胃粘膜定植密度与H.pylorivacA、cagA、iceA优势基因亚型vacAslaslc/m2、cagA+和iceA1均无相关性。