第一部分临床研究部分　　 第1章早期舌鳞癌复发原因及预后因素的分析　　 背景与目的：早期舌癌的治疗效果理想，但复发是影响早期舌癌治疗效果的重要因素，本研究回顾性分析227例早期舌癌的临床资料，探讨早期舌癌复发的主要原因及影响预后的因素。　　 方法：收集中山大学肿瘤防治中心1992～2003年首治的227例早期舌鳞癌患者的临床资料，Kaplan-Meier法对各影响因素进行生存率分析并计算生存率，log-rank法比较各因素不同水平生存分布的差异。Cox回归模型进行多因素分析，影响复发不同因素间比较用卡方检验。　　 结果：高分化鳞癌组复发率为19.3％，中低分化鳞癌组复发率为39.2％，二者的差异具有统计学意义(p=0.004)，综合治疗组复发率为15％，单纯手术组复发率为28％，二者的差异具有统计学意义(p=0.014)。复发组及非复发组3年及5年生存率分别为40.7％、87.3％及25.9％、80.3％，二者具有显著的统计学意义(p=0.000)。行颈清扫组及未行颈清扫组3年及5年生存率分别为为76.4％、75％及68％、61.2％，二者的差异具有统计学意义(p=0.023)；≥45岁组及＜45岁组3年及5年生存率分别为75.6％、78％及59.5％、66.1％，二者的差异具有统计学意义(p=0.021)。　　 结论：病理分级及是否进行综合治疗是影响早期舌癌复发的原因，患者的年龄、是否行颈清扫、是否复发是影响早期舌癌预后的因素，年龄及是否复发是影响预后的独立因素。　　 第2章晚期舌鳞癌的治疗及预后分析　　 背景与目的：晚期舌癌的预后差，治疗效果不理想，为改善晚期舌癌的治愈率及无瘤生存率，提高病人的生存质量，通过比较晚期舌鳞癌不同治疗方法的疗效并探讨影响其预后的因素，为临床提供参考。　　 方法：回顾性分析cTNM晚期170例舌鳞癌的临床及随访资料，Kaplan-Meier法计算累计生存率，Cox回归模型进行多因素分析。　　 结果：全组3年、5年生存率分别为42.4％、34.7％。单因素分析显示，择区颈清扫与全颈清扫比较对生存率无显著影响，差异无统计学意义，诱导化疗后手术与单纯化疗、化疗后放疗两组间的累计生存率差异有统计学意义，单纯放疗、化疗后放疗两组与手术后放疗组间的累计生存率间差异有统计学意义；多因素分析显示淋巴结转移，原发灶手术、原发灶大小及局部区域复发是影响预后的独立因素。　　 结论：淋巴结转移、原发灶手术、原发灶大小及局部区域复发是影响晚期舌鳞癌预后的独立因素；对晚期舌癌行择区颈淋巴清扫术对生存率无明显影响，对其行手术治疗或包含手术的综合治疗可以获得相对好的疗效，单纯化疗、单纯放疗及化疗后放疗疗效差。　　 第二部分基础研究部分RNA干扰COX-2基因表达对舌癌细胞的生物学特性影响及COX-2与VEGF-C在舌癌细胞中的关系研究　　 背景及目的舌癌是口腔颌面部常见的恶性肿瘤之一，其发生是多因素、多步骤的进行性发展过程，涉及到许多癌基因及抑癌基因的参与。很多研究证实COX-2基因在肿瘤发生中的作用，促进肿瘤血管的生成、抑制机体的免疫反应、刺激细胞增殖、抑制细胞凋亡、促进肿瘤的浸润和转移等。近年来研究表明,COX-2在舌癌组织中表达增多，且与预后有关。RNA干扰技术是近年来产生的新兴生物技术，可特异性地导致相应的mRNA降解，从而阻断特定基因的表达，这就为肿瘤提供了新的治疗手段。我们通过RNA干扰技术抑制COX-2基因的表达，观察舌癌细胞的增殖及侵袭能力的变化，并通过检测VEGF-C基因及蛋白的表达情况，观察二者是否存在的调节关系，从而探讨控制舌癌细胞的侵袭转移的策略以及探索舌癌基因治疗的靶点。　　 方法1、通过RT-PCR的方法检测COX-2基因及VEGF-C基因是否在舌癌细胞株TCA8113中表达。　　 2、根据siRNA设计原则，设计合成3对靶向COX-2基因的siRNA(siRNA-1，2，3)，采用阳离子脂质体试剂瞬时转染舌癌细胞TCA8113，利用荧光定量PCR和Western blot检测RNA干扰后COX-2基因的沉默效果，并筛选干扰效果较好的siRNA用于下一步实验。　　 3、采用阳离子脂质体试剂向舌癌细胞TCA8113转染靶向COX-2基因，下调COX-2基因的表达。于转染siRNA后24、48、72小时，应用realtime PCR及western blot检测干扰后COX-2基因及VEGF-C基因的表达情况，应用MTT法及boydenchamber小室细胞侵袭法检测舌癌细胞增殖及浸润能力的变化。　　 结果1、舌癌细胞株TCA8113中存在COX-2基因及VEGF-C基因的表达。　　 2、对siRNA转染组COX-2表达在mRNA和蛋白水平均有明显下调，与空白对照及阴性对照组比较，差异有显著性(P＜0.01)。　　 3、转染组VEGF-C基因及蛋白随着COX-2表达量的减低而降低，二者具有相关性，相关系数为0.72，与空白对照及阴性对照组均有显著差异(p＜0.01)。　　 4、转染组舌癌细胞的增殖能力明显降低，其生长曲线变缓，与空白组及阴性对照组有显著差异。boydenchamber小室细胞侵袭实验结果siRNA转染组穿膜细胞数明显减少，与空白对照组和阴性对照组比较，差异有显著性(P＜0.05)。　　 结论1.RNA干扰技术可高效地下调舌癌细胞TCA8113 COX-2基因的表达，可作为一种基因治疗的策略深入研究。　　 2.舌癌细胞COX-2基因下调后，细胞迁移和侵袭能力显著被抑制，表明COX-2可作为舌癌基因治疗的靶点。　　 3.舌癌细胞TCA8113 COX-2基因下调后，其VEGF-C基因表达也随之下调，二者具有相关性，表明COX-2基因对VEGF-C基因具有调控作用，其分子机制有待于进一步研究。