【摘 要】
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目的:宫颈癌是全球女性最常见的妇科恶性肿瘤之一,严重威胁着世界各地女性的健康。既往研究显示脂氧素A4(Lipoxin A4,LXA4)在多种炎症相关肿瘤的发生发展过程中起着重要作用,由此我们推想脂氧素类似物BML-111是否能通过调节缺氧诱导因子1α及5-脂加氧酶影响宫颈癌细胞的迁移能力,并在此基础上,探讨其相关的作用机制,为宫颈癌寻找新的治疗方法提供实验依据。方法:1、应用免疫组织化学法检测缺氧
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目的:宫颈癌是全球女性最常见的妇科恶性肿瘤之一,严重威胁着世界各地女性的健康。既往研究显示脂氧素A4(Lipoxin A4,LXA4)在多种炎症相关肿瘤的发生发展过程中起着重要作用,由此我们推想脂氧素类似物BML-111是否能通过调节缺氧诱导因子1α及5-脂加氧酶影响宫颈癌细胞的迁移能力,并在此基础上,探讨其相关的作用机制,为宫颈癌寻找新的治疗方法提供实验依据。方法:1、应用免疫组织化学法检测缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)和5-脂加氧酶(5-lipoxygenase,5-LOX)在42例宫颈癌(鳞状细胞癌36例,腺癌6例)组织和20例慢性宫颈炎组织中的表达情况,并以CD68标记巨噬细胞、CD31标记血管检测两种组织中巨噬细胞的数量和微血管的密度。2、通过MTT法检测BML-111对CoCl2诱导的Hela细胞存活率的影响。3、通过划痕实验和Transwell实验,检测BML-111对CoCl2诱导的Hela细胞迁移产生的影响。4、通过免疫荧光实验观察BML-111对Hela细胞HIF-1α表达产生的影响及HIF-1α在细胞内的定位。5、通过蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测BML-111对CoCl2诱导后细胞HIF-1α、5-LOX、MMP2及MMP9蛋白表达的影响。结果:1、IHC结果显示,HIF-1α在宫颈癌组织中的阳性表达率为71.43%(30/42),在慢性宫颈炎组织中的阳性表达率为0%(0/20);5-LOX在宫颈癌组织中的阳性表达率为78.57%(33/42),在慢性宫颈炎组织中的阳性表达率为40%(8/20);CD68在宫颈癌组织中的阳性表达率为71.43%(30/42),在慢性宫颈炎组织中的阳性表达率为15%(3/20);HIF-1α、5-LOX、CD68在慢性宫颈炎组织中的表达均低于宫颈癌组织(P<0.01)。宫颈癌组织中的微血管数43.111±10.3230明显高于慢性宫颈炎组织8.500±1.7795(P<0.01)。2、MTT结果:BML-111对CoCl2诱导的Hela细胞的增殖具有明显的抑制作用(P<0.05)。3、划痕实验和Transwell实验结果:BML-111对CoCl2诱导的Hela细胞迁移能力影响结果如下:CoCl2组相比于对照组,Hela细胞的迁移能力显著增强(P<0.01);CoCl2+BML-111组相比于CoCl2组,Hela细胞的迁移能力显著减弱(P<0.01);CoCl2+BML-111+Boc-2组相比于CoCl2+BML-111组,Hela细胞的迁移能力显著增强(P<0.01)。4、免疫荧光实验结果:HIF-1α主要定位在细胞核和细胞浆中表达,相比于对照组,CoCl2组的HIF-1α的表达明显增强,BML-111作用后,HIF-1α的表达减弱,若加入Boc-2预处理,BML-111的抑制作用消失(P<0.01)。5、蛋白免疫印迹实验结果:CoCl2组相对于空白对照组,Hela细胞中HIF-1α、5-LOX、MMP2、和MMP9蛋白表达均增高(P<0.05),CoCl2+BML-111组相对于CoCl2组,HIF-1α、5-LOX、MMP2、和MMP9蛋白表达均降低(P<0.05),CoCl2+BML-111+Boc-2组相对于CoCl2+BML-111组,HIF-1α、5-LOX、MMP2、和MMP9蛋白表达均增高(P<0.05)。结论:1、BML-111能抑制CoCl2诱导的Hela细胞的迁移能力。2、BML-111能通过负性调节HIF-1α和5-LOX抑制宫颈癌Hela细胞的迁移能力。
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研究背景和研究目的:非酒精性脂肪肝病(NAFLD)是指除酒精和其他明确的损肝因素外的其它因素导致的以脂质在肝细胞内过度累积为主要特征的临床病理综合症,是一种与胰岛素抵抗和遗传易感性相关的获得性代谢应激性肝损伤。近年来,由于生活方式和饮食习惯的改变,NAFLD的发病率越来越高,若不加以控制,NAFLD会进一步发展为不可逆的非酒精性脂肪肝肝炎和肝硬化,最终发展为肝癌。已有研究表明,CD38是哺乳类动物
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