micro RNA(mi RNA)是一种小分子非编码RNA,通过与转录后的m RNA结合从而抑制基因的表达。mi R-221调控多种疾病的发生、细胞凋亡等过程,而mi R-221对家兔骨骼肌卫星细胞(skeletal muscle satellite cells,SMSCs)增殖和分化的调控仍然不清楚。本试验以SMSCs为试验材料,研究mi R-221对SMSCs增殖和分化的影响。其主要结果如下:(1)使用mi Rwalk和Target Scan数据库预测mi R-221的靶基因,发现1,196个mi R-221的靶基因,其靶基因主要富集在细胞周期和凋亡过程等生物学过程,内质网和高尔基体等细胞组分,与RNA及DNA结合的相关转录因子激活等分子功能。对靶基因进行KEGG通路分析,发现其主要富集在癌症、PI3K-Akt、MAPK等信号通路;表明mi R-221对SMSCs的增殖和分化可能有重要的调控作用。(2)将分离出的SMSCs进行诱导分化,在SMSCs分化到第3 d有肌管形成,肌球蛋白重链(MHC)和肌细胞生成素(Myo G)的m RNA表达量随着分化进程持续升高,Desmin阳性细胞百分数达到95.6%,纯度满足实验要求。(3)检测mi R-221在84日龄新西兰兔心、肝、脾、肺、肾、腿肌和回肠的表达量表明,mi R-221在肝脏中表达量最高,在腿肌中中度表达。检测SMSCs分化过程中mi R-221的表达量表明,mi R-221的表达量先急剧升高,之后逐渐下降。(4)Ed U实验表明,过表达mi R-221组的Ed U阳性细胞百分数极显著(p<0.01)高于对照组,而抑制表达mi R-221组的Ed U阳性细胞百分数显著(p<0.05)低于对照组。CCK-8实验表明过表达mi R-221组在第96 h和120 h的活细胞数量极显著高于对照组,而抑制表达mi R-221组在第96 h和120 h的活细胞数量显著或极显著低于对照组。表明mi R-221能够促进SMSCs增殖。(5)分化实验表明,过表达mi R-221组的分化指数、Myo G和MHC的m RNA和蛋白表达量随着分化进程,在第3 d后显著或极显著低于对照组;抑制表达mi R-221表明,试验组SMSCs的分化指数、Myo G和MHC的m RNA和蛋白表达量随着分化进程,在第3 d后显著或极显著高于对照组。表明mi R-221能够抑制SMSCs分化。本试验优化了家兔骨骼肌卫星细胞的分离纯化过程;首次发现mi R-221能够促进家兔骨骼肌卫星细胞增殖,抑制家兔骨骼肌卫星细胞分化,为探索家兔的遗传机制提供理论依据,为进一步研究mi R-221的生物学功能提供理论依据。