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目的:建立兔肾穿刺造瘘(percutaneous nephrostomy)模型,观察穿刺通道中使用白芨胶(Bletilla glue)的止血时间、胶体吸收时间,观察尿液中术前术后晶体含量借以探讨形成结石的风险以及探讨穿刺通道中 TNF-α、IL-10表达的意义,了解白芨胶对肾脏穿刺创伤后是否引起感染以及促进穿刺通道的修复,为无管化经皮肾镜术(Tubeless Percutaneous Nephrolithotomy,TPCNL)提供一定的理论及循证医学依据。 方法:选用新西兰实验兔42只(雌雄不限),随机分成为建立肾穿刺造瘘模型后3天、1周、2周、3周、4周、6周和8周等7组,每组各6只实验兔。7组内每只实验兔两侧肾脏均建立输尿管梗阻和肾穿刺造瘘模型,穿刺后右侧肾脏通道内注入白芨多糖胶作为实验组,左侧肾脏穿刺通道不作任何处理作为对照组,分别观察两侧肾脏穿刺孔的出凝血时间。7组实验兔分别于术后3天、1周、2周、3周、4周、6周和8周行耳缘静脉空气栓塞法处死,切取右侧肾脏(实验组)及左侧肾脏(对照组),肉眼观察肾穿刺通道胶体吸收时间、创口愈合及周围组织情况,取两侧穿刺通道肾脏组织标本。采用HE染色观察穿刺通道肾组织的病理变化,采用免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测穿刺通道中TNF-α、IL-10的含量。建模前及处死各组实验兔时均行膀胱穿刺留取尿液标本,行尿常规检查,采用全自动尿常规检测仪检测尿液中晶体含量。 结果: 1.穿刺通道肾组织病理变化:①对照组:肾穿刺造瘘模型建立后3天通道内可见大量炎性细胞浸润,但无明显肉芽组织以及新生血管形成,通道内充满大量陈旧性红细胞及少量新鲜红细胞;1-2周通道内仍然有大量陈旧红细胞及少量新生血管形成;3周时通道内才可见较多成熟的血管腔,伴有少量纤维组织增生以及炎性细胞浸润;4-8周可见大量明显老化的纤维形成的瘢痕组织。②实验组:肾穿刺造瘘模型建立后3天肾脏的穿刺通道内可见大量胶体,以及少量新生肉芽组织及新生血管形成,伴炎性细胞浸润;1周通道中胶体量未见明显减少,新生肉芽组织增生及新生血管形成明显,伴炎性细胞浸润;2周穿刺通道中有少量胶体,大部分吸收,可见大量成熟纤维组织形成及陈旧性红细胞及胶体吸收后的残留腔隙,炎性细胞浸润仍较明显;3周肾脏穿刺通道中未见胶体残留,可见大量明显老化的纤维组织而形成的较窄线性瘢痕组织;4-8周穿刺通道肾组织病理变化可见较3周时出现更多、更密集和更成熟的瘢痕组织。 2.凝血时间的比较分析:对照组和实验组间凝血时间具有明显差异,对照组凝血时间平均为(142.64±28.90)s,实验组凝血时间平均为(90.55±26.19)s,对照组凝血时间明显比实验组长(P<0.05)。 3.尿液中晶体含量变化:建模前尿液中均未见晶体,建模后3天尿液晶体含量(403uL),1周时尿液晶体含量(893.5uL)达到峰值,随后开始降低,2周尿液晶体(42.5uL),3周后逐渐消失(3.5uL)。 4.免疫组织化学法检测穿刺通道肾组织IL-10和TNF-α的表达变化:①实验组的IL-10各时期阳性表达的积分光密度值为:3天(154.44±12.32),1周(217.65±13.27),2周(233.62±13.27),3周(146.32±12.32),4周(82.68±7.56),6周(88.37±5.62),8周(86.41±8.56)。对照组的IL-10各时期积分光密度值为:3天(78.28±9.87),1周(92.21±4.49),2周(180.79±8.76),3周(181.31±6.96),4周(182.41±11.11),6周(144.68±9.52),8周(84.61±9.14)。②实验组的TNF-α各时期阳性表达积分光密度值为:3天(83.99±7.39),1周(96.46±6.88),2周(135.18±9.48),3周(123.86±9.05),4周(118.91±7.83),6周(89.03±7.32),8周(85.24±7.75)。对照组的TNF-α各时期积分光密度值为:3天(82.19±9.76),1周(85.54±6.42),2周(146.77±11.83),3周(175.68±7.82),4周(169.89±9.42),6周(117.28±11.97),8周(78.89±6.58)。 结论: 1.白芨胶可明显减少肾穿刺通道的出血时间,增加凝血功能。 2.白芨胶在肾穿刺通道中吸收时间2-3周,可避免继发性动静脉瘘及微小血管瘤的可能。 3.白芨胶可产生一定的晶体,但较快时间的吸收可减少结石形成的风险。 4.白芨胶应用于肾穿刺通道中后,IL-10表达增强,促进了穿刺通道的愈合。 5.白芨胶应用于肾穿刺通道中后,TNF-α表达减弱,减轻了肾脏的进一步损伤。