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目的1.探索临床心肌肥厚病人在疾病发生发展中体内有哪些micro RNAs发生差异性表达,影响体内复杂的基因转录及转录后调控情况;2.验证mir-31靶向于Nfatc2ip基因,抑制其转录后翻译的进行,从而降低心肌细胞中Nfatc2ip蛋白的合成;3.探索β-细辛醚是否通过影响mir-31的表达来抗高负荷型心肌肥厚。方法1.收取健康受试者和临床诊断为心肌肥厚的患者的血清,提取外周游离micro RNAs进行测序,采用生物信息学方法分析差异表达的micro RNAs,选取感兴趣的micro RNA进行靶基因预测。2.采用模式生物SD大鼠造主动脉缩窄(TAC)模型,对各组大鼠行超声心动检测,分析各大鼠心功能状况,判断造模成功,病理实验分析各组大鼠心肌组织的肥大情况,对各组大鼠心脏组织中心肌肥厚相关标志物进行WB检测,研究β-细辛醚抗心肌肥厚相关蛋白表达的作用从而探讨β-细辛醚对TAC模型大鼠的抗心肌肥厚作用,并提取各组大鼠心肌组织(n=3)进行micro RNA测序,对表达差异的micro RNAs进行筛选,和人测序数据对比分析后选取差异下调的mir-31作为研究对象,预测其下游靶为Nfatc2ip;q PCR检测TAC模型大鼠心肌组织中mir-31和Nfatc2ip的RNA表达,探索β-细辛醚是通过调控mir-31表达来调节Nfatc2ip的蛋白水平,进而影响心肌肥大相关基因的转录与翻译;构建Nfatc2ip 3’UTR区双荧光素酶报告基因,验证Nfatc2ip就是mir-31的靶基因。结果1.人外周游离microRNA测序并qPCR验证得到mir-218和mir-31显著下调,mir-4497显著上调。2.TAC造模后行超声心动检测各项心功能相关指标,行病理染色观察各组大鼠心肌组织的病理形态变化,结果显示造模模型大鼠心肌肥厚明显,β-细辛醚可以有效降低心肌肥厚。3.对各组大鼠检测心肌肥厚相关蛋白水平,结果表明模型组大鼠心肌肥厚相关蛋白表达显著上升,β-细辛醚可以一定程度抑制其表达,达到抗心肌肥厚的作用。4.与假手术组比较,模型组大鼠中mir-31显著下降,其可能的靶基因Nfatc2ip含量升高,β-细辛醚组大鼠心肌组织中mir-31显著上升,其可能的靶基因Nfatc2ip含量降低,结果表明,β-细辛醚可以上调模型大鼠心肌组织中mir-31的表达从而抑制Nfatc2ip的合成。5.报告基因的结果表明mir-31靶向于Nfatc2ip,即β-细辛醚是通过调控mir-31靶向Nfatc2ip基因,进而影响心肌肥大相关基因的转录。结论1.mir-31靶向于Nfatc2ip基因,抑制其转录后翻译的进行,从而降低心肌细胞中Nfatc2ip蛋白的合成;2.β-细辛醚可以通过调控mir-31的表达来调控心肌肥厚发展过程中相关心肌肥厚标志基因的表达,达到抗心肌肥大的作用。