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目的：探讨脊髓水平NO及神经型一氧化氮合酶(nNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在小鼠骨癌痛发生中的作用。
方法：72只C3H/HeJ小鼠随机分为肿瘤组(n=40)和假手术组(n=32)，其中肿瘤组进一步分成5组：T7组(肿瘤细胞接种后7 d)，T10组(接种后10 d)和T14组(接种后14 d)，L组(接种后14 d+L-NMMA)和C组(接种后14 d+溶剂)，假手术组相应分为S7组(假手术后7 d)、S10组(假手术后10 d)、S14(假手术后14 d)和S组(假手术后14 d+溶剂)。将含2×105个纤维肉瘤NCTC2472细胞的最小必需培养基(α-MEM)注射到小鼠右侧股骨远端骨髓腔内，制作骨癌痛模型，假手术组注入不含肿瘤细胞的α-MEM。于接种前1 d，接种后3d、5 d、7 d、10 d、14 d检测痛行为学指标：机械痛缩足阈值(PWMT)和热痛缩足潜伏期(PWTL)。按照分组在相应时间点处死小鼠，用RT-PCR的方法检测脊髓腰膨大nNOS和iNOS mRNA水平；用免疫组化的方法观察脊髓背角nNOS和iNOS蛋白的变化。术后14 d，L组小鼠鞘内注射NOS抑制剂L-NMMA50μg，给药前及给药后2 hr、12 hr、24hr检测小鼠PWMT和PWTL的变化。
结果：(1)所有小鼠在接种后3 d都出现痛行为学改变，但肿瘤组和假手术组小鼠之间的差别无统计学意义；接种后5 d，所有小鼠的痛行为学指标都恢复到接种前水平。接种后7 d，肿瘤小鼠PWMT降低到(1.10±0.28)g，与假手术鼠(1.85±0.28)g相比P<0.05；接种后10 d，肿瘤小鼠的PWTL(13.4±2.2)s较假手术小鼠(17.8±1.5)s缩短，肿瘤小鼠的痛行为学随时间逐渐加重；(2)肿瘤细胞接种后10 d，T10组小鼠脊髓水平nNOS mRNA表达(0.65±0.21)较S10组(0.46±0.11)增高(P<0.05)，接种后14 d，T14和S14组小鼠脊髓水平nNOS mRNA表达无统计学差异；T7和S7组小鼠脊髓都有iNOS mRNA表达，T10组小鼠在接种后10 d脊髓水平iNOS mRNA的表达(0.93±0.41)较S10组(0.60±0.35)增高(P<0.05)，T14组的iNOS mRNA(0.95±0.43)也维持高水平表达，T10组和T14组之间脊髓水平iNOS mRNA表达无统计学差异。(3)T10组小鼠脊髓背角nNOS阳性神经元较S10组增多，T14组阳性细胞较T10组减少，但仍高于假手术鼠水平；T14组小鼠脊髓背角iNOS阳性细胞接明显增多，脊髓腹侧有iNOS阳性细胞；(4)L组小鼠鞘内注射L-NMMA50μg2 hr后PWMT从(0.40±0.27)g增加到(0.90±0.28)g，PWTL从(10.1±2.3)s增加到(16.2±0.9)s，12 hr后改善的PWMT和PWTL有所下降，24 hr后药物改善骨癌痛行为学的作用消失。
结论：脊髓水平NO参与小鼠骨癌痛的发生和维持；脊髓水平nNOS可能在骨癌痛发生的早期起作用，而骨癌痛的维持则依赖于iNOS；鞘内注射NOS抑制剂能够有效改善骨癌痛小鼠的痛行为学。