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目的:探讨刺五加皂甙对体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的影响。
方法:将刺五加皂甙以不同浓度和时间作用于肝癌SMMC-7721细胞,采用台盼蓝活细胞拒染法记活细胞数;MTT比色法观察细胞毒性;采用HE染色法、观察细胞凋亡的形态;原位末端标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡率;采用琼脂糖凝胶电泳法观察DNA降解;采用免疫组化法检测bcl-2蛋白和bax蛋白的表达。
结果:刺五加皂甙以剂量依赖和时间依赖的方式抑制SMMC-7721细胞的生长。HE染色观察到细胞皱缩、核质浓缩、核碎裂、细胞起泡以及凋亡小体形成等凋亡特性的形态学改变。浓度为0.25mg/ml、0.5mg/ml、1.0mg/ml的刺五加皂甙处理12h后,细胞凋亡率分别为(7.500±0.9258)﹪,(13.875±1.1260)﹪,(30.625±2.6693)﹪,与对照组(2.250±1.0351)﹪比较均有显著性差异。24h后的细胞凋亡率分别为(13.625±1.0607)﹪,(21.750±1.4880)﹪,(45.250±2.4928)﹪,48h后的细胞凋亡率分别为(18.125±2.0310)﹪,(31.000±3.5456)﹪,(53.375±3.2486)﹪,与对照组(3.875±0.8345)﹪和(4.375±1.0607)﹪比较均有显著性差异。DNA电泳出现梯状改变,bcl-2蛋白的表达显著下降,bax蛋白的表达明显升高,呈现时间剂量依赖性。
结论:刺五加皂甙抑制人肝癌细胞株SMMC-7721的增殖,诱导细胞凋亡。诱导细胞凋亡与bcl-2蛋白的表达显著下降,bax蛋白的表达明显升高有关,呈现时间剂量依赖性。为临床治疗肝癌提供依据,它也许会成为临床治疗肝癌的有效抗肿瘤药物。