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奶牛乳房炎是阻碍奶牛养殖业发展最主要的奶牛疾病之一，导致严重的经济损失。金黄色葡萄球菌是奶牛乳房炎主要病原微生物之一。近年来，越来越多不同动物源性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的出现，特别是致病性牛源MRSA的出现，就意味着奶牛乳房炎面临着更为严峻的挑战。而国内有关牛源MRSA的报道鲜见。本研究旨在了解甘肃和上海地区乳房炎金黄色葡萄球菌的耐药性、MRSA的分布情况及MRSA分离株的基因分型特点，为奶牛乳房炎的防治、乳房炎MRSA的流行监测提供理论依据。1采用K-B纸片扩散法，检测分离自甘肃和上海地区共69株临床型奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌对8种常用抗菌药物的敏感性，用琼脂稀释法检测金黄色葡萄球菌的苯唑西林最小抑菌浓度（MICs）和万古霉素最小抑菌浓度（MICs）。菌株对庆大霉素、环丙沙星、四环素、头孢唑啉、万古霉素和苯唑西林的敏感性超过60%，且对万古霉素的敏感性高达100%；而对青霉素、磺胺异恶唑的耐药性分别达到95.7%和89.9%。2用头孢西丁纸片扩散法和PCR方法对受试菌株进行MRSA的检测。两种检测方法的结果不一致，PCR方法共检出28株（40.58%）mecA基因阳性菌株，其中17株（24.63%）OS-MRSA，11株（15.94%）MRSA；甘肃地区8株OS-MRSA，上海地区11株MRSA和9株OS-MRSA；头孢西丁纸片扩散法仅在上海地区检出16（23.19%）株MRSA且其中5株的苯唑西林MIC≤1μg/mL。3用PCR方法检测mecA基因阳性菌株的PVL毒力基因；用PCR方法扩增mecA基因阳性菌株spa基因的X区域，测序后根据数据库（http://www.ridom.de/spaserver/）进行分型；用多重PCR方法对mecA基因阳性菌株的SCCmec染色体盒进行基因分型。两种主要的基因型被分出，甘肃8株OS-MRSA、上海5株OS-MRSA和5株MRSA为spa t267、SCCmec typeⅤ,且都不携带PVL毒力基因；上海地区4株MRSA和4株OS-MRSA为spa t1234，SCCmec typeⅡ,且都不携带PVL毒力基因；2株上海地区MRSA分别为SCCmectypeⅡ和typeⅤ且都不携带PVL毒力基因，其spa基因型均未被分出。受试菌株的总体耐药情况较严重，首次从甘肃、上海地区的部分奶牛养殖场分离到OS-MRSA和MRSA，且感染率高。首次发现基因型为PVL毒力基因阴性、SCCmec typeⅤ、spa t267和PVL毒力基因阴性、SCCmec typeⅡ、spa t1234的乳房炎MRSA，这两种遗传背景的MRSA在在调查地区为主要流行菌株，且在世界范围内都少有报道，它们是否广泛存在于中国地区的奶牛养殖场，还需要进一步调查证实。由于OS-MRSA携带mecA耐药基因而对苯唑西林敏感，若在没检测mecA基因的情况下，这类菌株很可能在药敏试验中被错误分类为MSSA。根据本研究的结果和其它相关OS-MRSA的报道，警示在鉴定MRSA时应当用基因检测方法并结合表型检测方法。