研究目的本实验通过膜过滤分离肿瘤细胞(ISET)的方法来检测进展期胃癌患者化疗后外周血中的循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC),检测CTC的检出率,并分析CTC与患者临床特征(包括分化程度、TNM分期、浸润深度、远处转移、淋巴结转移等)的联系,初步探讨CTC与胃癌相关肿瘤标志物的相关性,评估其做为进展期胃癌化疗疗效指标的可能性。研究方法1、入组的病人为2015年9月至2016年4月福建医科大学附属协和医院收治的经病理证实确诊为进展期胃癌的患者共44例,在患者化疗结束后一周内采集患者外周血标本。以上均已征得患者的充分知情同意,在医院伦理委员会批准下签署检测知情同意书。2、通过ISET的方法来富集循环肿瘤细胞,根据细胞尺寸的差别,利用CTC和正常血液细胞在大小形态、细胞变形能力、细胞流体特性等物理学差异,将CTC截留在微孔过滤膜上,然后对滤膜上截留的细胞通过迪夫快速(Diff-Quick)染色,将滤膜贴附到病理载玻片制片后,可在光学显微镜下进行结果判读。3、所有数据均使用SPSS 19.0进行统计分析,组间差异比较采用t检验/方差分析或卡方χ2检验。所有的检测数据均采用双侧检验,P值小于0.05有统计学意义(P<0.05)。研究结果1、我们以外周血中CTC≥4个/5m L定义为CTC阳性,CTC<4个/5m L则为阴性,其中CTC阳性的有17例,阳性率为38.6%。2、通过检测44例进展期胃癌的外周血CTC,我们发现CTC阳性率与肿瘤的分化程度密切相关(P=0.040),差异有统计学意义,而其检出率与年龄、性别、胃癌发病部位、临床TNM分期、浸润深度、淋巴结转移情况、远处转移情况、有无癌栓、是否手术等均未发现差异有统计学意义(P>0.05)3、CTC阳性组和CTC阴性组在CA724数值大小方面差异有统计学意义(P<0.05),而这两组在CA199、CEA差值无统计学意义(P>0.05)。4、44例进展期胃癌的患者根据化疗方案可以分为氟嘧啶+铂类组、氟嘧啶组、紫杉烷组、伊立替康组四组,这四组间的循环肿瘤细胞阳性率的差异无统计学意义(P=0.541)。44例患者根据疗效评价标准分为两组,即CR/PR/SD组和PD组,CR/PR/SD组共有23例,阳性患者有5例(21.7%),PD组的患者一共是21例,阳性患者有12例(57.1%),两组间循环肿瘤细胞阳性率的差异有统计学意义(P=0.029)。结论1、应用ISET技术监测外周血中的循环肿瘤细胞可排除EMT来源的CTC的干扰,增加检测的敏感度,提高检出率。2、44例进展期胃癌的患者,低分化组进展期胃癌的CTC阳性率要明显高于高-中分化组,差异有统计学意义。3、CA724的含量与进展期胃癌外周血中CTC的阳性率呈正相关,这两个指标联合检测有可能能做为进展期胃癌患者预后与辅助化疗疗效评价的考虑因素。4、进展期胃癌的辅助化疗疗效与CTC阳性率有关,CTC数目多的患者可能更容易发生耐药以及预后不佳,检测CTC水平可以辅助评估化疗疗效。