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乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,也是继肺癌之后导致女性因肿瘤死亡的第二号杀手,肿瘤转移则是致使乳腺癌患者死亡的主要原因。发现并研究乳腺癌发生及转移相关基因具有重要的应用价值。哺乳动物RhoGTPases的GDP解离抑制因子(RhoGDIs)家族成员包括RhoGDI1,RhoGDI2和RhoGDI3,它们具有抑制RhoGTPases上的GDP解离、GTP水解以及协助RhoGTPases在功能位点间穿梭的功能。RhoGDI2牵涉到多种癌症的转移进程,而至今尚无RhoGDI2在人乳腺癌临床水平研究的报道。本研究应用免疫组织化学技术检测了71例乳腺癌病例中RhoGDI2的表达状况,同时探讨了RhoGDI2的表达水平与乳腺癌患者病理资料间的相关性。我们还借助半定量RT-PCR和Western印迹检测了RhoGDI2在4种具有不同体内转移能力的人乳腺癌细胞株中的表达状况。结果显示,伴随乳腺上皮细胞的增生与癌变,RhoGDI2的表达水平呈现先升高后降低的两阶段变化模式,在本研究涉及的细胞株中也观察到了这一变化模式。同时,单变量和多变量分析表明,在恶性程度最高的乳腺上皮中RhoGDI2表达水平的下调与临床上肿瘤的淋巴结转移之间具有显著的正相关性(P<0.01)。为研究RhoGDI2在乳腺癌中是否作为肿瘤转移抑制因子行使功能,我们借助体外的生长曲线检测、细胞周期检测、软琼脂集落形成能力检测、伤口愈合实验和Boyden小室浸润实验,以及体内的裸鼠肺转移实验分析了RhoGDI2的过表达对乳腺癌细胞株MDA-MB-231生长及转移能力的影响。结果表明,在体外RhoGDI2不仅抑制肿瘤的转移还可能影响原发肿瘤的生长,而其体内相应功能仍需进一步的研究来确定。这些结果提示RhoGDI2牵涉到乳腺癌的发生及发展进程并且可能作为肿瘤转移的分子标记。癌症基因组解剖计划(CGAP)为借助生物信息学筛选与癌症发生及发展过程相关的基因提供了强大的研究平台。本研究借助CGAP开发的数字基因表达展示(DGED)软件对CGAP收录的表达系列分析(SAGE)数据库进行了乳腺癌与正常组织、细胞株间差异表达基因的检索。检索所得基因再通过半定量RT-PCR在乳腺癌细胞株及病理组织中进行验证。在生物信息检索及RNA水平检测中,EVL均表现为在癌组织中的表达水平高于它在正常组织中表达水平。EVL隶属Ena/VASP蛋白家族,该蛋白家族成员还包括VASP和Mena,它们在调节肌动蛋白细胞骨架的功能中具有广泛的作用。有越来越多的研究表明VASP和Mena牵涉到癌症发生,但目前尚无EVL相关研究的报道。我们借助荧光定量RT-PCR检测了35对乳腺癌样本中EVL的表达水平。EVL在65.7%的肿瘤组织中的表达水平高于它在相应正常组织中的表达水平(P=-0.032)。同时EVL的相对表达水平与临床分期之间具有统计学相关性(P=0.021)。为初步探索相应机理,我们借助平板集落形成实验,生长曲线检测和细胞迁移实验分别检测EVL转化NIH3T3细胞和调节MCF-7细胞体外移动的能力。结果表明EVL的过表达不足以转化NIH3T3细胞,但能促进MCF-7细胞的体外移动能力。本研究显示EVL在乳腺癌组织中的表达水平高于它在正常组织中的表达水平;EVL相对表达水平与乳腺癌的临床分期正相关。此外,EVL可能牵涉到人乳腺癌的浸润和/或转移。