【摘 要】
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Flotillin-1是一种普遍存在的高度保守的同源蛋白。一般来说,Flotillin-1在膜组织、物质运输和分子信号转导中起重要作用,Flotillin-1在高表达时可能会扰乱肿瘤发生过程中的膜结构域稳态,从而影响着肿瘤的发展。过去的几项研究报道了Flotillin-1在多种癌症类型中高表达,但是Flotillin-1在胃癌细胞中具体作用机制还需进一步探讨。顺铂是一种铂类抗癌药物,已广泛用于治疗
【基金项目】
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吉林省科技发展计划项目 （20210101364JC）；
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Flotillin-1是一种普遍存在的高度保守的同源蛋白。一般来说,Flotillin-1在膜组织、物质运输和分子信号转导中起重要作用,Flotillin-1在高表达时可能会扰乱肿瘤发生过程中的膜结构域稳态,从而影响着肿瘤的发展。过去的几项研究报道了Flotillin-1在多种癌症类型中高表达,但是Flotillin-1在胃癌细胞中具体作用机制还需进一步探讨。顺铂是一种铂类抗癌药物,已广泛用于治疗各种癌症类型,但是其耐药性的产生限制了它的应用。因此,规避顺铂耐药性是抗癌治疗的关键目标,需要探索可用于逆转肿瘤顺铂耐药的联合策略。基于此,研究了Flotillin-1在人胃癌进展中的作用,并评估了Flotillin-1是否有助于人胃癌细胞对顺铂的敏感性。首先,检测了人胃黏膜细胞和胃癌细胞中Flotillin-1的表达。其次,转染si RNA和sh RNA构建Flotillin-1低表达的稳定细胞系。流式细胞术和Transwell检测Flotillin-1对人胃癌细胞的影响。结果表明,与人胃黏膜细胞相比,Flotillin-1在人胃癌细胞中高表达;敲低Flotillin-1可显著抑制人胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并且影响细胞周期、凋亡相关标志蛋白（Bcl-2、Cleaved-caspase-3、CDK-2、CDK-4和Cyclin B1）的表达。然后,将Flotillin-1与顺铂的功能联系到一起,发现敲降Flotillin-1和顺铂联合使用可以更好的抑制人胃癌细胞的增殖、集落形成和凋亡。为了进一步研究Flotillin-1对人胃癌细胞的影响机制,选择了与肿瘤密切相关蛋白激酶B（AKT）和细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路作为研究对象,结果发现,Flotillin-1沉默之后可以抑制AKT和ERK的蛋白磷酸化水平,并且,与对照组相比,BGC-823和MGC-803细胞的增殖受到PI3K/AKT抑制剂（LY294002）或MEK/ERK抑制剂（U0126）的显著抑制,LY294002和U0126抑制剂的组合极大地抑制了这两种细胞的增殖。Flotillin-1沉默对细胞增殖抑制的影响与联合LY294002和U0126抑制剂对细胞的抑制效果相同。这些结果表明Flotillin-1通过AKT和ERK信号通路发挥作用。此外,为了进一步研究体内的作用,构建裸鼠荷瘤人胃癌模型来验证Flotillin-1对人胃癌细胞敏感性的影响。体内实验结果表明,与对照组相比,敲降Flotillin-1和顺铂联合使用可以更有效的抑制肿瘤生长。综上所述,本研究表明降低Flotillin-1的表达可以抑制人胃癌细胞增殖,Flotillin-1可作为胃癌诊断的分子标志物,可作为治疗胃癌的潜在新靶点进行探索。通过把Flotillin-1和癌症耐药性联系起来,有助于探索一种新的治疗胃癌的方法。
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