论文部分内容阅读
目的:探讨醋酸钠林格液限制性复苏失血性休克大鼠对其肝组织细胞因子及其核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:取32只健康Sprague Dawley(SD)大鼠,建立失血性休克模型。随机分为休克未复苏组(CR组,n=8)、生理盐水限制性复苏组(NR组,n=8)、乳酸钠林格液限制性复苏组(LR组,n=8)和醋酸钠林格液限制性复苏组(AR组,n=8)。NR组、LR组及AR组于休克维持1h后,应用不同的复苏液(生理盐水、乳酸钠林格液和醋酸钠林格液)对其休克大鼠采取限制性液体复苏。复苏方式为:先通过采用不同复苏液使休克大鼠平均动脉压(MAP)复苏至60mmHg,观察30min后继续将MAP提升至80mmHg纠正休克。限制性复苏完成后各组大鼠观察4h取其肝组织,CR组则继续维持大鼠休克状态,仅诱导休克后观察4h取其肝组织(若大鼠死亡则即刻获取)。肝组织于4%多聚甲醛溶液固定后,采取HE染色并在显微镜下观察其病理学改变,应用实时定量PCR法检测肝组织的TNF-αmRNA、IL-4mRNA和IL-10 mRNA表达水平,应用蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测肝组织p65(Ser536)磷酸化和p65(Lys310)乙酰化的蛋白表达量。结果:1.肝组织病理学显示AR组较CR组、NR组及LR组肝细胞混浊肿胀明显减轻,炎性细胞浸润较少,肝细胞间淤血较少,未见明显肝细胞坏死表现。2.与CR组(10.41±5.45)、NR组(10.16±3.71)及LR组(7.87±2.58)比较,AR组肝组织TNF-αmRNA(5.06±2.59)表达水平降低(P<0.05)。3.与CR组(0.69±0.31)比较,AR组肝组织IL-4 mRNA(7.26±3.03)表达水平明显增加(P<0.01);与NR组(3.89±2.74)及LR组(4.33±1.96)比较,AR组肝组织IL-4 mRNA表达水平增加(P<0.05)。4.与CR组(0.81±0.53)及NR组(4.04±2.40)比较,AR组肝组织IL-10mRNA(9.33±3.79)表达水平明显增加(P<0.01);与LR组(4.97±2.46)比较,AR组肝组织IL-10 mRNA表达水平增加(P<0.05)。5.与CR组(0.44±0.13)及NR组(0.33±0.06)比较,AR组肝组织p65(Ser536)磷酸化(0.18±0.11)表达水平明显降低(P<0.01);与LR组(0.27±0.04)比较,AR组肝组织p65(Ser536)磷酸化表达水平降低(P<0.05)。6.与CR组(0.40±0.09)及NR组(0.30±0.05)比较,AR组肝组织p65(Lys310)乙酰化(0.15±0.10)表达水平明显降低(P<0.01);与LR组(0.24±0.05)比较,AR组肝组织p65(Lys310)乙酰化表达水平降低(P<0.05)。结论:1.采取不同晶体液对失血性休克大鼠早期进行限制性液体复苏,醋酸钠林格液相比常规复苏液(生理盐水及乳酸钠林格液)可以较好的改善肝组织病理学变化,更进一步降低了肝组织促炎因子TNF-α释放及提升了抗炎因子IL-4和IL-10早期表达水平,从而更明显的保护失血性休克大鼠的肝损伤。2.醋酸钠林格液早期限制性复苏失血性休克大鼠可以抑制其肝组织p65(Ser536)磷酸化和p65(Lys310)乙酰化表达水平。因此,可能是通过抑制NF-κB信号传导通路的激活来减少促炎因子的释放和提升抗炎因子的水平,进而减轻休克导致的大鼠肝损伤。